[发明专利]新型嵌合酶及其应用

权利要求书

1.一种细胞质嵌合酶，其包含或由以下组成：

-至少一个加帽酶催化结构域，特别地，所述加帽酶选自由以下组成的组：cap-0典型加帽酶、cap-0非典型加帽酶、cap-1加帽酶和cap-2加帽酶；和

-至少一个蛋白质-RNA拴系系统RNA结合结构域；

其中所述RNA结合结构域与所述蛋白质-RNA拴系系统的RNA元件特异性结合，所述RNA元件由特定RNA序列和/或结构组成。

2.根据权利要求1所述的嵌合酶，其特征在于，其包含或由以下组成：

-至少一个RNA三磷酸酶催化结构域；

-至少一个鸟苷酰基转移酶催化结构域；

-至少一个N⁷-鸟嘌呤甲基转移酶催化结构域；和

-至少一个蛋白质-RNA拴系系统RNA结合结构域；

特别地，其中至少一个所述催化结构域是cap-0典型加帽酶的催化结构域，更特别地是病毒cap-0典型加帽酶的催化结构域。

3.根据权利要求1或2所述的嵌合酶，其中所述RNA结合结构域是噬菌体蛋白质-RNA拴系系统的噬菌体RNA结合结构域。

4.根据权利要求3所述的嵌合酶，其中所述RNA结合结构域是选自由以下组成的组的噬菌体蛋白的噬菌体RNA结合结构域：MS2外壳蛋白、R17外壳蛋白和λ形噬菌体N抗终止蛋白。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的嵌合酶，其特征在于，其进一步包含至少一个poly(A)聚合酶催化结构域。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的嵌合酶，其特征在于，其进一步包含至少一个DNA依赖性RNA聚合酶催化结构域，特别是噬菌体DNA依赖性RNA聚合酶催化结构域。

7.一种分离的核酸分子或一组分离的核酸分子，所述核酸分子编码根据权利要求1至6中任一项所述的嵌合酶，或者分离的核酸分子编码嵌合酶，其特征在于，其序列包含编码蛋白质-RNA拴系系统的RNA结合结构域的核酸序列，所述核酸序列与以下核酸序列框内融合，特别是按顺序框内融合：

-编码至少一个poly(A)聚合酶催化结构域的核酸序列；和

-编码至少一个加帽酶催化结构域的核酸序列；

其中所述RNA结合结构域与所述蛋白质-RNA拴系系统的RNA元件特异性结合，所述RNA元件由特定RNA序列和/或结构组成。

8.根据权利要求7所述的分离的核酸分子，其特征在于，其序列进一步包含编码至少一个DNA依赖性RNA聚合酶催化结构域，特别是噬菌体DNA依赖性RNA聚合酶催化结构域的核酸序列。

9.根据权利要求7或8所述的分离的核酸分子，其特征在于，其序列进一步包含编码核糖体跳跃基序的核酸序列，所述编码核糖体跳跃基序的核酸序列位于所述编码poly(A)聚合酶催化结构域的核酸序列与所述编码至少一个加帽酶催化结构域的核酸序列之间。

10.根据权利要求7至9中任一项所述的分离的核酸分子，其与至少一个选自由以下组成的组的启动子可操作地连接：

-RNA聚合酶II的启动子；

-噬菌体DNA依赖性RNA聚合酶的启动子；和

-权利要求6或8中所定义的所述DNA依赖性RNA聚合酶的启动子。

11.一种载体，其包含根据权利要求7至10中任一项所述的核酸分子。

12.一种宿主细胞，其包含根据权利要求7至10中任一项所述的核酸分子或根据权利要求7至10中任一项所述的一组分离的核酸分子或根据权利要求11所述的载体。

13.一种基因工程改造的非人类真核生物，其表达由根据权利要求7至10中任一项所述的核酸分子或根据权利要求7至10中任一项所述的一组分离的核酸分子编码的嵌合酶。