[发明专利]用于重组蛋白表达的融合标签

权利要求书

1.一种融合蛋白，其包含DEEP融合标签和靶蛋白。

2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中所述DEEP融合标签在所述靶蛋白的N端。

3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白，其中所述DEEP融合标签包含多个表面暴露的组氨酸残基。

4.根据权利要求1、2或3所述的融合蛋白，其中所述DEEP融合标签包含氨基酸序列：MYGKLNDLLEDLQEVLKNLHKNWHGGKDNLHDVDNHLQNVIEDIHDFMQGGGSGGKLQEMMKEFQQVLDELNNHLQGGKHTVHHIEQNIKEIFHHLEELVHR(SEQ ID NO:1)。

5.根据权利要求1、2或3所述的融合蛋白，其中所述DEEP融合标签包含氨基酸序列：YGHLNDLLEDLQEVLHNLHHNWHGGHDNLHDVDNHLQNVIEDIHDFMQGGGSGGHLQEMMHEFQQVLDELNNHLQGGHHTVHHIEQNIHEIFHHLEELVHR(SEQ ID NO:10)。

6.根据前述权利要求中任一项所述的融合蛋白，其还包含所述DEEP融合标签和靶蛋白之间的接头氨基酸序列。

7.根据权利要求6所述的融合蛋白，其中所述接头氨基酸序列包含聚甘氨酸序列。

8.根据前述权利要求中任一项所述的融合蛋白，其还包含所述DEEP融合标签和所述靶蛋白之间的切割位点。

9.根据权利要求8所述的融合蛋白，其中所述切割位点是蛋白酶切割位点。

10.根据权利要求8所述的融合蛋白，其中所述切割位点是化学切割位点。

11.根据前述权利要求中任一项所述的融合蛋白，其中所述靶蛋白选自绿色荧光蛋白(GFP)、β淀粉样(Aβ)多肽、Trp笼蛋白、LS3多肽、胰岛素A链多肽和胰岛素B链多肽。

12.根据前述权利要求中任一项所述的融合蛋白，其包含第一靶蛋白和第二靶蛋白，其中所述第二靶蛋白不同于所述第一靶蛋白。

13.根据权利要求12所述的融合蛋白，其中所述第一靶蛋白是在所述DEEP融合标签的C端，和所述第二靶蛋白是在所述DEEP融合标签的N端。

14.根据权利要求12或13所述的融合蛋白，其中所述第一靶蛋白是胰岛素A链多肽，和所述第二靶蛋白是胰岛素B链多肽。

15.根据前述权利要求中任一项所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白在约4至约10的pH范围是稳定的。

16.一种核酸分子，其编码前述权利要求中任一项所述的融合蛋白。

17.一种宿主细胞，其包含权利要求16所述的核酸。

18.根据权利要求17所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是大肠杆菌。

19.一种获得靶蛋白的方法，其包括以下步骤：

a.将编码融合蛋白的DNA构建体引入到宿主细胞中，其中所述融合蛋白包含DEEP融合标签和靶蛋白；

b.在所述宿主细胞中表达所述融合蛋白；

c.分离所述融合蛋白；和

d.切割所述融合蛋白以将所述DEEP融合标签与所述靶蛋白分开；

从而获得所述靶蛋白。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述融合蛋白通过所述DEEP融合标签与亲和树脂的结合而分离。