[发明专利]使用阳离子交换色谱法分离三轻链抗体

权利要求书

1.一种将H2L3抗体或其抗原结合片段从包含H2L3抗体或其抗原结合片段和H2L2抗体或其抗原结合片段的抗体组合物中分离的方法，所述方法包括：

(i)将所述抗体组合物施加到阳离子交换树脂，使得H2L3抗体或其抗原结合片段和H2L2抗体或其抗原结合片段结合于所述树脂；

(ii)将具有约3.8至约5.0的pH的洗脱组合物施加到所述阳离子交换树脂；以及

(iii)收集从所述树脂洗脱的H2L2组合物。

2.一种将H2L3抗体或其抗原结合片段从包含H2L3抗体或其抗原结合片段和H2L2抗体或其抗原结合片段的抗体组合物中分离的方法，所述方法包括：

(i)将所述抗体组合物施加到阳离子交换树脂，使得H2L3抗体或其抗原结合片段和H2L2抗体或其抗原结合片段结合于所述树脂；

(ii)将具有约300mM至约600mM的盐浓度的洗脱组合物施加到所述阳离子交换树脂；以及

(iii)收集从所述树脂洗脱的H2L2组合物。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述H2L2组合物中的所述抗体或其抗原结合片段的不超过2％是H2L3抗体或其抗原结合片段。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述H2L2组合物中的所述抗体或其抗原结合片段的不超过1％是H2L3抗体或其抗原结合片段。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述H2L2组合物中的所述抗体或其抗原结合片段的不超过0.5％是H2L3抗体或其抗原结合片段。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述H2L2组合物中的所述抗体或其抗原结合片段的至少98％、至少99％或至少99.5％是H2L2抗体或其抗原结合片段。

7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述H2L2组合物包含施加到所述阳离子交换树脂的所述抗体组合物中的所述H2L3抗体或其抗原结合片段的不超过25％、不超过20％、不超过15％、不超过10％或不超过5％。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述H2L2组合物包含选自柱体积1-9的一个或多个洗脱柱体积。

9.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述H2L2组合物包含洗脱柱体积1-4。

10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述阳离子交换树脂包含交联聚(苯乙烯二乙烯苯)。

11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述阳离子交换树脂包含磺丙基(-CH₂CH₂CH₂SO₃-)表面官能团。

12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述阳离子交换树脂的粒度为约50μm。

13.如权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述阳离子交换树脂具有双峰孔径分布。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述双峰孔径分布包括直径为约500nM的孔隙和直径为约22nM的孔隙。

15.如权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述阳离子交换树脂是POROS^TM强阳离子交换树脂XS。

16.如权利要求1或3-15中任一项所述的方法，其中所述洗脱组合物包含盐。

17.如权利要求16所述的方法，其中所述洗脱组合物中的所述盐是氯化物盐。