[发明专利]来自iPS细胞的具有遗传多样性的T细胞群体的制备方法

说明书

[课题]提供通过iPS细胞制备具有遗传多样性的再生T细胞群体的方法及相关再生T细胞群体。[解决手段]通过iPS细胞制备具有遗传多样性的再生T细胞群体的方法，其包括：(1)自采集的具有遗传多样性的T细胞群体，浓缩对于目标组织或抗原具有指向性的T细胞群体的工序，(2)将上述浓缩的T细胞群体重编程为iPS细胞，在维持遗传多样性的同时培养iPS细胞的工序，及(3)自上述培养的iPS细胞制备具有遗传多样性的再生T细胞群体的工序。

技术领域

本发明涉及制备具有遗传多样性的再生T细胞群体的方法及相关再生T细胞群体。

背景技术

T细胞在免疫系统中对于细菌或者病毒等外来病原体或癌细胞等异常细胞起到主要的作用，若出于各种原因导致T细胞功能下降，则认为受试者变得具有易感染性，导致罹患癌症等。对于此类疾病而言，若能够补充、再生免疫细胞等，则将成为对于疾病的症状改善、治疗效果的提高等极为有效的手段。

已提出使用自iPS细胞等多能性干细胞诱导的T细胞进行补充疗法。以iPS细胞作为原料，通过使用对于目标抗原具有特异性的T细胞，可制备与原来的T细胞具有相同抗原特异性的再生T细胞(非专利文献1；本文献的内容，以其整体引入本说明书中作为参照)。在此方法中，所建立的iPS细胞是以来自单一细胞的细胞群体(集落，colony)为单位进行克隆化的。由此，细胞性状稳定，向目标细胞、组织的分化效率高，可利用通过基因分析等确认无变异或异常的iPS细胞株。在此，为了确认克隆的质量或对患者的适用性，有必要对克隆逐个检查，而克隆化一直以来被认为是重要的工序。

另一方面，在使用人及小鼠的研究中，在针对感染性疾病、肿瘤进行T细胞补充疗法时，已知通过使用具有遗传多样性的T细胞群体的方法可诱导针对目标组织、抗原的多种免疫反应，同时该方法不易受到由于抗原表达低下或变异而产生的免疫逃逸(escape)的影响，因此获得高的治疗效果。

另外，现有技术中，尽管存在向外周血T细胞导入T细胞受体(TCR)、人工抗原受体(嵌合抗原受体：CAR)的基因导入法，但其使用的T细胞所具有的抗原受体的基因序列是单一的。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：Cell Stem Cell(2013)12(1):114-126

发明概述

发明要解决的课题

现有的利用iPS细胞株的方法中，尽管进行克隆化，但由于克隆化等效于排除选定的克隆以外的其他克隆，使得建立iPS细胞的阶段所存在的遗传多样性完全丧失。由此，只能利用以单一的抗原表位为对象的免疫反应。然而，以单一的抗原表位为对象的免疫反应中，由于容易受到抗原分子的表达低下或变异等引起的免疫逃逸(escape)的影响，产生了难以获得高的治疗效果的问题。另一方面，在现行的T细胞补充疗法中，尽管能够使用具有遗传多样性的T细胞群体，但由于T细胞群体在体外的扩增使得T细胞发生疲劳，产生针对抗原的免疫反应下降的问题。为此，为了能够用于T细胞补充疗法中，期望开发制备具有遗传多样性的再生T细胞群体的新的方法。

因此，本发明的课题是提供介由iPS细胞来制备具有遗传多样性的再生T细胞群体的方法，以及相关的再生T细胞群体。本发明的另一方面的课题是将通过上述方法能够获得的再生T细胞群体用于T细胞补充疗法中。另外，本发明的进一步的另一方面的课题是将肿瘤浸润T细胞用作上述方法的原材料的T细胞群体。

解决课题的手段

本发明的发明人在探讨现有方法中的问题时发现，如果介由iPS细胞来制备具有遗传多样性的再生T细胞群体，则能够解决只能利用以单一抗原表位为对象的免疫反应的问题以及T细胞群体的疲劳的问题。即，本发明的要点为：

[1]介由iPS细胞制备具有遗传多样性的再生T细胞群体的方法，其包括：