[发明专利]对称二甲基精氨酸的检测

说明书

本公开大体上涉及对称二甲基精氨酸(SDMA)的检测。更具体地，本公开涉及使用固相检测SDMA。本公开提供了用于检测样品(诸如来自动物的生物样品)中的对称二甲基精氨酸(SDMA)的装置、试剂、试剂盒和方法。该方法包括通过使用免疫测定形式(诸如竞争性免疫测定)检测样品中SDMA的存在或量。该测定包括使用对SDMA有特异性并且对其他精氨酸衍生物具有较低亲和力的SDMA抗体。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2017年10月19日提交的美国临时专利申请第62/574,592号和于2017年12月15日提交的美国临时专利申请第62/599,117号的优先权，其每一个通过引用整体并入本文。

背景

技术领域

本公开大体上涉及对称二甲基精氨酸(SDMA)的检测。更具体地，本公开涉及使用固相检测SDMA。

相关技术

检测来自动物的生物样品中的游离SDMA可以提供动物肾脏功能的指示。肾脏疾病和病症(例如，肾损伤、肾功能不全、慢性肾病、肾小球肾炎、糖尿病肾病、间质性肾炎、多囊肾和高血压肾病)往往会降低整体肾脏功能，包括GFR(肾小球滤过率)，并可以通过多种方式诊断，包括使用常见的肾脏标志物肌酐和BUN。通过比较健康和患病动物中SDMA、BUN和肌酐的水平，样品中SDMA的水平可与动物的疾病状态相关。因此，显示正常(参考范围)肌酐和BUN的“健康”动物将具有比患病动物更低的SDMA水平。通常，患有肾脏病症/疾病的动物将具有比肾功能正常的动物更高的血清SDMA水平。在健康人中，血浆SDMA水平通常为0.3-0.7μmol/l(J Am Soc Nephrol(2006)17:1128-1134；Eur J Clin Invest.2007June；37(5):364-371.Nephrol Dial Transplant(2003)18:2542-2550；Nephrol Dial Transplant(2006)21:2446-2451；Kidney International,(2001)59(78):S14-SI 8)。

类似地，生物样品中游离SDMA的水平可以用作动物心脏病的标志物。可以将样品中SDMA的水平与心脏疾病的已知标志物的水平进行比较，以确定用于诊断心脏病的边界范围(J Am Soc Nephrol(2006)17:1128-1134)。

因此，发明人已经确定本领域需要精确和有效地测定来自人和其他动物的样品中的SDMA。

发明内容

在一个方面，本公开涉及一种装置，其包括固体基质，例如多孔基质，所述固体基质具有非扩散地结合于其上的颗粒，其中所述颗粒包括捕获试剂，所述捕获试剂包括分析物或所述分析物衍生物的类似物，所述分析物或所述分析物衍生物的类似物共价连接于与颗粒连接的蛋白质。在各种实施方式中，蛋白质可以共价或非共价地连接到颗粒。蛋白质可以是牛血清白蛋白(BSA)、卵白蛋白、匙孔血蓝蛋白(KLH)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)中的一种或多种。与BSA、卵白蛋白或KLH的非共价连接相比，蛋白质与颗粒的非共价连接可以更耐受表面活性剂或高盐浓度。衍生物可以是精氨酸衍生物，诸如甲基化精氨酸衍生物，例如不对称二甲基精氨酸(ADMA)、L-精氨酸、N-甲基精氨酸(MMA)、酰化ADMA、酰化L-精氨酸和酰化MMA。基质可以布置在盒体或壳体中。

在另一个方面，本公开涉及捕获试剂，其包括连接到颗粒的N-甲基精氨酸(MMA)或酰化MMA的类似物。在各种实施方式中，类似物可以通过连接基团与颗粒结合。类似物可以与连接到颗粒的蛋白质共价连接，并且蛋白质可以与颗粒共价或非共价连接。蛋白质可以是牛血清白蛋白(BSA)、卵白蛋白、匙孔血蓝蛋白(KLH)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)中的至少一种。

连接基团可包括以下结构：

且捕获试剂可以是：