[发明专利]使用可调节内含子的表达控制

权利要求书

1.用于在细胞中产生表达产物的合成核酸表达构建体，所述核酸表达构建体包含与编码所述表达产物的核酸序列有效连接的启动子序列，编码所述表达产物的所述核酸序列包含编码可调节内含子的序列，所述可调节内含子是包含可切除序列的内含子，所述可切除序列能够通过细胞中的未折叠蛋白反应(UPR)体系从所述合成表达构建体产生的转录物中剪接出去/剪接掉，从而产生编码功能性表达产物的转录物。

2.权利要求1所述的合成核酸表达构建体，其中所述可调节内含子能够被IRE1蛋白或者其同源物或直系同源物剪接掉。

3.权利要求1或2所述的合成核酸表达构建体，其中所述表达产物是蛋白质。

4.前述权利要求中任一项所述的合成核酸表达构建体，其中剪接掉所述可调节内含子的可切除序列允许来自编码所述表达产物的核酸序列的转录物正确翻译，从而允许产生所期望的表达产物。

5.前述权利要求中任一项所述的合成核酸表达构建体，其中所述内含子在来自编码所述表达产物的核酸序列的转录物中的存在导致从所述转录物中翻译出无功能的蛋白质。

6.前述权利要求中任一项所述的合成核酸表达构建体，其中剪接掉所述可调节内含子的所述可切除序列消除所述转录物中的提前终止密码子。

7.前述权利要求中任一项所述的合成核酸表达构建体，其中剪接掉所述可调节内含子的所述可切除序列导致所述转录物中位于所述可调节内含子下游的序列发生阅读框移位。

8.前述权利要求中任一项所述的合成核酸表达构建体，其中所述可切除序列的核苷酸长度不可被3整除。

9.前述权利要求中任一项所述的合成核酸表达构建体，其中所述可调节内含子包含序列CNG/CNG-Xn-CNG/CNG，其中Xn代表长度为n个碱基的序列，其中/代表切割位点，并且其中序列CNG-Xn-CNG从所述转录物中切除。

10.权利要求9所述的合成核酸表达构建体，其中Xn的长度为10至500个核苷酸，更优选15至350个核苷酸，更优选15至100个核苷酸，更优选15至35个核苷酸，更优选20至25个核苷酸。

11.前述权利要求中任一项所述的合成核酸表达构建体，其中所述可调节内含子包含序列CNG/CNG-Xn-CNG/CNG[CG]，其中Xn代表长度为n个核苷酸的序列，其中/代表切割位点，使得在剪接时可切除序列CNG-Xn-CNG从所述转录物中切除，其中序列Xn的5’端的核苷酸为C或G。

12.权利要求9至11中任一项所述的合成核酸表达构建体，其中Xn包含序列CACUCAGACUACGUGCACCU(SEQ ID NO：1)或与其至少60％相同的序列。

13.权利要求12所述的合成核酸表达构建体，其中Xn包含以下序列之一或由其组成：

-CACUCAGACUACGUGCACCU(SEQ ID NO：1)；

-CACUCAGACUACGUGCUCCU(SEQ ID NO：2)；

-CACUCAGACUACGUGCCCCU(SEQ ID NO：3)；

-CACUCAGACUACGUGCGCCU(SEQ ID NO：4)；和

-CACUCAGACUAUGUGCACCU(SEQ ID NO：5)。

14.前述权利要求中任一项所述的合成核酸表达构建体，其中所述可调节内含子包含序列CNG/CNGCACUCAGACUACGUGCACCUCNG/CNGC(SEQ ID NO：6)，或与其至少60％相同的序列。