[发明专利]用于表达G蛋白偶联受体或其亚基的构建体及其用途在审
申请号: | 201880069162.7 | 申请日: | 2018-10-16 |
公开(公告)号: | CN111278981A | 公开(公告)日: | 2020-06-12 |
发明(设计)人: | 下村一平;山本岳;上泷将史;飞田直哉 | 申请(专利权)人: | 日本烟草产业株式会社 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/12;C12Q1/02 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 沈雪 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 表达 蛋白 受体 构建 及其 用途 | ||
1.一种构建体,其用于表达G蛋白偶联受体蛋白或其亚基,所述构建体在单一载体中从5’侧起依次包含:编码G蛋白α亚基蛋白的核酸、包含IRES序列的核酸、以及编码G蛋白偶联受体蛋白或其亚基的核酸。
2.根据权利要求1所述的构建体,其中,G蛋白偶联受体或其亚基是视紫红质样受体类型或代谢性谷氨酸受体/代谢性信息素受体类型的G蛋白偶联受体。
3.根据权利要求1所述的构建体,其中,G蛋白偶联受体是视紫红质样受体类型的G蛋白偶联受体。
4.根据权利要求1所述的构建体,其中,G蛋白偶联受体为苦味受体。
5.根据权利要求1~4中任一项所述的构建体,其中,载体为质粒载体。
6.根据权利要求1~4中任一项所述的构建体,其中,载体为包含CMV启动子的质粒载体。
7.根据权利要求1~4中任一项所述的构建体,其中,载体为包含CMV启动子及潮霉素抗性基因的质粒载体。
8.根据权利要求1~4中任一项所述的构建体,其中,载体为包含EF1α启动子的质粒载体。
9.根据权利要求1~4中任一项所述的构建体,其中,载体为包含EF1α启动子及嘌呤霉素抗性基因的质粒载体。
10.根据权利要求1~9中任一项所述的构建体,其中,IRES序列为2型的IRES序列。
11.根据权利要求1~10中任一项所述的构建体,其中,IRES序列为来自脑心肌炎病毒的IRES序列。
12.根据权利要求1~7中任一项所述的构建体,其中,在编码G蛋白偶联受体蛋白或其亚基的核酸的5’侧包含编码具有提高G蛋白偶联受体蛋白或其亚基向细胞膜的转移的功能的多肽的核酸。
13.根据权利要求12所述的构建体,其中,提高G蛋白偶联受体蛋白或其亚基向细胞膜的转移的多肽是包含大鼠的生长抑素受体的N末端45个氨基酸的多肽、或包含牛的视紫红质的N末端39个氨基酸的多肽。
14.根据权利要求1~13中任一项所述的构建体,其中,G蛋白α亚基蛋白为Gq家族的G蛋白α亚基蛋白、Gi家族的G蛋白α亚基蛋白、Gs家族的G蛋白α亚基蛋白、或者它们的嵌合蛋白。
15.根据权利要求1~14中任一项所述的构建体,其中,G蛋白α亚基蛋白为Gα16、Gαgust或Gαolf、或者它们的嵌合蛋白。
16.根据权利要求1~15中任一项所述的构建体,其中,G蛋白α亚基蛋白为人Gα16/大鼠Gαgust。
17.根据权利要求16所述的构建体,其中,G蛋白α亚基蛋白为人Gα16/大鼠Gαgust43。
18.根据权利要求1~17中任一项所述的构建体,其中,G蛋白偶联受体蛋白为人的G蛋白偶联受体蛋白。
19.基因导入了权利要求1~18中任一项所述的构建体的转化细胞。
20.物质的生理反应的测定方法,该方法包括:将物质添加于权利要求19所述的转化细胞,对该物质引起的生理反应进行测定。
21.根据权利要求20所述的测定方法,其中,物质为苦味物质、气味物质、鲜味物质或甜味物质、或者对这些物质的调节物质。
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