[发明专利]3-羟基丙酸的生产与分离

权利要求书

1.一种表达系统，其包含可被小分子诱导的第一启动子、第二启动子、编码参与3-HP、3-HP盐或B12合成的蛋白质的第一基因、经修饰的UTR以及编码来自天然脱氮假单胞菌(Pseudomonas denitrificans)蛋白质的N-末端至多20个氨基酸的天然序列，其中该天然序列可操作地连接到所述经修饰的UTR的3'-末端，并且可操作地连接到所述第一基因的5'端，并且所述第一和第二启动子以串联形式可操作地连接到所述经修饰的UTR的上游。

2.根据权利要求1所述的表达系统，其中进一步包含第三启动子和编码被配置为调节所述第一基因的表达的转录调节子的第二基因，其中所述第三启动子可操作地连接到所述第二基因。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的表达系统，其中所述第二启动子可被所述小分子诱导。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的表达系统，其中所述天然序列可操作地连接至所述第一基因的5'-末端以定义融合基因，所述第二启动子是所述天然脱氮假单胞菌蛋白质的天然启动子，并且所述第二启动子可操作地连接至所述融合基因的5'-末端。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的表达系统，其中所述第一启动子可操作地连接到所述第二启动子的5'-末端，所述第二启动子可操作地连接到所述经修饰的UTR的5'-末端，并且所述经修饰的UTR可操作地连接到所述融合基因的5'末端。

6.一种核酸，其包含第一和第二启动子，其中所述第一启动子是诱导型启动子，并且可被小分子诱导；所述第一和第二启动子与第一基因可操作地连接；并且所述第一基因编码参与3-羟基丙酸(3-HP)、3-HP盐或辅酶B12合成的蛋白质。

7.根据权利要求6所述的核酸，其中所述第一基因编码参与3-羟基丙酸(3-HP)合成的蛋白质，并且选自甘油脱水酶、甘油脱水酶再活化酶和醛脱氢酶。

8.根据权利要求6或7所述的核酸，其中所述第一基因包含选自dhaB1、dhaB2、dhaB3、gdrA、gdrB和kgsA的至少一个基因。

9.根据权利要求6-8中任一项所述的核酸，其中所述第一基因包括dhaB1基因、dhaB2基因、dhaB3基因、gdrA基因和gdrB基因。

10.根据权利要求6-8中任一项所述的核酸，其中所述第一基因是dhaB1，并且所述序列包含与SEQ ID NO：1至少95％相同的序列。

11.根据权利要求6-8中任一项所述的核酸，其中所述第一基因是dhaB2，并且所述序列包含与SEQ ID NO：2至少95％相同的序列。

12.根据权利要求6-8中任一项所述的核酸，其中所述第一基因是dhaB3，并且所述序列包含与SEQ ID NO：3至少95％相同的序列。

13.根据权利要求6-8中任一项所述的核酸，其中所述第一基因是gdrA，并且所述序列包含与SEQ ID NO：4至少95％相同的序列。

14.根据权利要求6-8中任一项所述的核酸，其中所述第一基因是grdB，并且所述序列包含与SEQ ID NO：5至少95％相同的序列。

15.根据权利要求7所述的核酸，其中所述第一基因包含醛脱氢酶基因。

16.根据权利要求15所述的核酸，其中所述醛脱氢酶是kgsA。

17.根据权利要求16所述的核酸，其中kgsA包含与SEQ ID NO：6至少95％相同的序列。