[发明专利]端到端细胞治疗自动化

权利要求书

1.一种用于自动产生基因修饰的免疫细胞培养物的方法，所述方法包括：

(a)用活化剂活化免疫细胞培养物以产生活化的免疫细胞培养物；

(b)用载体转导活化的免疫细胞培养物，以产生转导的免疫细胞培养物；

(c)扩增转导的免疫细胞培养物；

(d)浓缩(c)中的扩增的免疫细胞培养物；和

(e)收获(d)中的浓缩免疫细胞培养物以产生基因修饰的免疫细胞培养物，

还包括洗涤扩增的免疫细胞培养物和浓缩的免疫细胞培养物之一或两者，

其中(a)至(e)由完全封闭的细胞工程系统进行，并且(a)至(e)通过产生基因修饰的免疫细胞培养物的过程进行优化。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述过程是自我调节过程，并且包括：

(a)用温度传感器、pH传感器、葡萄糖传感器、氧气传感器、二氧化碳传感器和光密度传感器中的一者或多者进行监测；和

(b)基于所述监测，调节转导的T细胞培养物的温度、pH值水平、葡萄糖水平、氧气水平、二氧化碳水平和光密度中的一者或多者。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述方法产生至少约1亿个存活的基因修饰的免疫细胞。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述方法产生至少约20亿个存活的基因修饰的免疫细胞。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述免疫细胞培养物是T细胞培养物。

6.根据权利要求5所述的方法，其中T细胞培养物是嵌合抗原受体T(CAR T)细胞培养物。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述载体对嵌合抗原受体进行编码。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述免疫细胞培养物包括外周血单核细胞和/或纯化的T细胞。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述免疫细胞培养物包含至少一个佐细胞。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述佐细胞包括单核细胞或单核细胞衍生的细胞。

11.根据权利要求9所述的方法，其中所述佐细胞包含T细胞受体的抗原，包括CD28、CD40、CD2、CD40L和/或ICOS。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的方法，其中，所述活化剂包括抗体或树突细胞。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述抗体被固定在表面上。

14.根据权利要求13所述的方法，其中，所述表面是珠的表面。

15.根据权利要求12所述的方法，其中所述抗体是可溶性抗体。

16.根据权利要求12-15中任一项所述的方法，其中所述抗体包含抗CD3抗体和抗CD28抗体中的至少一种。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述转导包括病毒感染、电穿孔、膜破坏或其组合。

18.根据权利要求1-17中任一项所述的方法，其中所述载体是慢病毒载体或逆转录病毒。

19.根据权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述转导包括将所述载体在细胞培养基中混合并将所述培养基中的所述载体均匀地递送至所述活化的免疫细胞培养物。