[发明专利]抗体纯化

权利要求书

1.纯化抗体的方法，其包括：

(a)提供包含异源抗体的羊乳清，任选地脱脂羊乳清；

(b)使所述乳清与含有蛋白A的基质接触；

(c)使所述含有蛋白A的固体基质与所述乳清分离；以及

(d)从所述含有蛋白A的固体基质中洗脱所述异源抗体；

其中在洗脱所述异源抗体之前，内源性羊抗体被洗脱。

2.根据权利要求1所述的方法，其包括：

(a)提供包含异源抗体的羊乳，任选地脱脂羊乳；

(b)从所述乳中去除酪蛋白以获得乳清；

(c)使所述乳清与含有蛋白A的基质接触；

(d)使所述含有蛋白A的固体基质与所述乳清分离；以及

(e)从所述含有蛋白A的固体基质中洗脱所述异源抗体；

其中在洗脱所述异源抗体之前，内源性羊抗体被洗脱。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其包括：

(a)提供包含异源抗体的羊乳；

(b)对所述乳进行脱脂；

(c)从所述脱脂乳中去除酪蛋白以获得乳清；

(d)使所述乳清与含有蛋白A的基质接触；

(e)使所述含有蛋白A的固体基质与所述乳清分离；以及

(f)从所述含有蛋白A的固体基质中洗脱所述异源抗体；

其中在洗脱所述异源抗体之前，内源性羊抗体被洗脱。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述内源性羊抗体在低于用于洗脱所述异源抗体的pH的pH下洗脱；优选地，其中所述用于洗脱内源性羊抗体的pH为4.0至5.0，优选4.3至5.0，更优选4.5至5.0，例如pH为4.7或4.8。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述方法包括色谱法，优选填充床(柱)色谱法。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中在与所述乳清孵育之前，所述蛋白A固体基质和/或所述乳清被平衡至pH为5至8，优选6至7。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述异源抗体在高于用于洗脱所述内源性羊抗体的pH的pH下洗脱，优选地，其中洗脱所述异源抗体包括将pH调节至2至5，优选2.0至4.5，例如2.0至4.3或2.0至4.0的pH。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述异源抗体不是羊抗体。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述异源抗体是用于兽医用途的抗体。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述异源抗体是鼠抗体、牛抗体、猪抗体、犬抗体、猫抗体或马抗体。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述异源抗体是IgG抗体。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述异源抗体是单克隆抗体。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述乳清包含天然内源性羊抗体。

14.根据权利要求2至13中任一项所述的方法，其中去除酪蛋白包括将pH调节至3.5至5.0，优选4.0至4.5，更优选4.3的pH，随后优选通过过滤和/或离心去除沉淀的酪蛋白。

15.根据权利要求3至14中任一项所述的方法，其中对所述乳进行脱脂包括将所述乳加热至30至60℃，优选地45至55℃的温度，随后优选通过离心去除脂肪。