[发明专利]基于细胞的疫苗的生产

说明书

本公开提供了一种用于细胞保存的方法，例如将暴露于电离辐射的细胞冷冻保存。

技术领域

本公开涉及细胞保存，例如暴露于电离辐射的细胞的冷冻保存。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2017年12月4日提交的美国临时专利申请号62/594,317的优先权和权益，所述申请的全部内容以引用方式整体并入本文。

以电子方式提交的文本文件的描述

在此以电子方式提交的文本文件的内容以引用方式整体并入本文：计算机可读格式的序列表副本(文件名：HTB-028PC_SequenceListing_ST25；记录日期：2018年11月28日；文件大小：13.6KB)。

背景技术

将细胞储存在液氮中仍然是最安全的细胞保存方法。暴露于电离辐射(IR)的细胞的冷冻保存已显示会诱导对活细胞的损害，但是细胞对冷冻保存的反应知之甚少。当前的方法需要在细胞培养期间以规则间隔获得新鲜灭活的细胞，并且需要不断地接近辐射源。冷冻细胞的照射已证明可改善功能、均匀度并延长其功能寿命。照射的细胞在冷冻时不会受到辐射的影响，直至冷冻的细胞解冻。因此，为了保持细胞活力，所述过程需要与细胞培养物制造设施接近(并与之紧密整合)的照射设施。这种组合通常在工业放大规模上并不常见。由于此限制，存在对延长细胞寿命和功能性的方法的需求和改进。

发明内容

本公开基于以下令人惊奇的发现，即照射冷冻保存后的癌症疫苗细胞保留了细胞活力和代谢功能。

在一些方面，本公开提供了一种用于保存细胞的方法，所述方法包括在容器中获得新鲜收获的细胞；使收获的细胞与液氮接触；以及向所述细胞施用一定剂量的电离辐射(IR)。

在一些实施方案中，所述方法还包括将细胞储存于液氮中。

在一些实施方案中，所述方法提高细胞活力。

在一些实施方案中，所述方法提高细胞回收率。

在一些实施方案中，用γ辐射照射细胞。在一些实施方案中，对细胞的照射使细胞不能复制。在一些实施方案中，当施用γ照射时，细胞是非增殖性的。在一些实施方案中，所施用的辐射剂量在1(Gy)、5(Gy)、10(Gy)、20(Gy)、30(Gy)、40(Gy)、50(Gy)、60(Gy)、70(Gy)、80(Gy)、90(Gy)、100(Gy)、110(Gy)或120(Gy)之间，包括所有端点

在一些实施方案中，所施用的辐射剂量为至少120(Gy)γ辐射。

在一些实施方案中，细胞表达修饰的且可分泌的疫苗蛋白。在一些实施方案中，修饰的且可分泌的疫苗是热激蛋白，其是gp96-Ig。

在一些实施方案中，细胞是肿瘤细胞，例如但不限于肺或膀胱肿瘤细胞。在一些实施方案中，肿瘤细胞是Vesigenurtacel-L(HS-110)。在一些实施方案中，肿瘤细胞是Vesigenurtacel-L(HS-410)。

在一些方面，所述方法提供了用于生产细胞，所述细胞包含编码修饰的且可分泌的疫苗蛋白的载体，所述细胞具有提高的细胞活力和/或细胞回收率。在一些实施方案中，所述细胞在培养中扩增。

在一些方面，本发明涉及一种用于进行癌症治疗的方法，其通过：在容器中获得新鲜收获的细胞，其中所述细胞是肿瘤细胞，所述肿瘤细胞包含编码修饰的且可分泌的疫苗蛋白的载体；将收获的细胞与液氮接触；以及以至少120(Gy)的剂量向所述细胞施用一定剂量的电离辐射(IR)。在实施方案中，所述方法还包括将细胞储存在液氮中。在实施方案中，所述修饰的且可分泌的疫苗是gp96-Ig。在实施方案中，所述肿瘤细胞是vesigenurtacel-L(HS-110)或vesigenurtacel-L(HS-410)。

附图说明