[发明专利]皂苷提取

说明书

含有至少QS‑21主峰和2018组分的皂树（Quillaja saponaria Molina）的粗制水性提取物，其中如通过在214 nm的UV吸光度测得的2018组分/QS‑21主峰的比率≤0.075，获得这样的提取物的方法和相关方面。

技术领域

本申请大体上涉及皂苷提取物，特别是皂树（Quillaja saponaria Molina）的粗制水性提取物、它们的制备方法和相关方面。

发明背景

在疫苗中包括佐剂以改进体液和细胞免疫反应，特别是在弱免疫原性亚单位疫苗的情况下。类似于被病原体自然感染，佐剂依赖于激活先天免疫系统以促进持久的获得性免疫。

The Adjuvant System 01 (AS01)是含有两种免疫刺激剂3-O-脱酰基-4’-单磷酰脂质A（3-O-desacyl-4’-monophosphoryl lipid A）（3D-MPL）和QS-21的基于脂质体的佐剂（Garcon和Van Mechelen, 2011；Didierlaurent等人, 2017）。3D-MPL是来自沙门氏菌（Salmonella minnesota）的脂多糖的无毒衍生物（其是TLR4激动剂），QS-21是来自南美树木皂树（Quillaja saponaria Molina）树皮的天然皂苷提取物（Kensil等人, 1991；Ragupathi等人, 2011）。AS01包括在最近开发的疟疾疫苗（RTS,S - Mosquirix®）和带状疱疹疫苗（HZ/su - Shingrix®）和正在开发中的对抗例如人免疫缺陷病毒和结核杆菌之类的病原体的多种候选疫苗中。

AS01注射在动物模型中导致先天免疫的迅速和瞬时激活。嗜中性粒细胞和单核细胞在免疫时被迅速募集到引流淋巴结（dLN）。此外，AS01诱发T细胞活化所需的MHCII^high树状细胞（DC）的募集和激活（Didierlaurent A.M.等人, 2014）。也可获得关于AS01的组分的作用机制的一些数据。3D-MPL通过TLR4发出信号，以刺激NF-ĸB转录活性和细胞因子产生，并直接激活人体和小鼠中的抗原呈递细胞（APCs）（De Becker等人, 2000；Ismaili等人,2002；Martin等人, 2003；Mata-Haro等人, 2007）。QS-21促进小鼠的高抗原特异性抗体反应和CD8⁺ T细胞反应（Kensil和Kammer, 1998；Newman等人, 1992；Soltysik等人, 1995）和人类的抗原特异性抗体反应（Livingston等人, 1994）。由于其物理性质，认为QS-21可能在体内充当危险信号（Lambrecht等人, 2009；Li等人, 2008）。尽管QS-21已显示激活ASC-NLRP3炎性小体和随后的IL-1β/IL-18释放（Marty-Roix, R.等人, 2016），尚未清楚地界定皂苷的佐剂效应中涉及的精确分子途径。

关于被批准为人类药物的产品的任何组分，QS-21的生产要求使用批准的制备方法和小心控制最终组成以确保其符合所需规范。现有方法的修改需要昂贵和耗时的重新验证，仍偏离规范也会导致浪费。仍然需要用于制备QS-21的稳健方法和限定组成的QS-21材料。

发明概述

在第一方面中，本发明提供一种皂树的粗制水性提取物，其含有至少QS-21主峰和2018组分，其中如通过在214 nm的UV吸光度测得的2018组分/QS-21主峰的比率≤0.075。

在第二方面中，本发明提供一种皂树的粗制水性提取物，其含有

QS-21AV1

QS-21AV2