[发明专利]用于细胞相关联的α疱疹病毒疫苗的改良稀释剂

说明书

本发明涉及稀释剂用于在使用中稳定被细胞相关联的α疱疹病毒感染的细胞的用途。与将大量蛋白胨掺入用于这样的病毒感染细胞的稀释剂的长期做法不同，发现减少稀释剂中蛋白的量改善感染α疱疹病毒的细胞在使用中的稳定性。因此，甚至使用不含蛋白的稀释剂也可获得最佳稳定性。对于表达异源插入的重组HVT病毒，这种作用尤为显著。对于生产的成本、安全性和一致性而言，不含蛋白对于稀释剂的生产是非常有利的。

技术领域

本发明涉及疫苗学领域，更具体地，本发明涉及稀释剂用于在使用中稳定被细胞相关联的α疱疹病毒感染的细胞的用途，本发明还涉及对针对细胞相关联的α疱疹病毒的疫苗的所述在使用中稳定的方法，以及用于制备所述疫苗的方法。

背景技术

α疱疹病毒是人和地球上几乎所有动物物种的重要病原体，因此对于与商业性农业相关的动物物种而言也是重要病原体。提供廉价有效的保护以免受感染和疾病的首选方法是通过疫苗接种。例如，在商业化家禽养殖业中，通常为家禽接种马立克氏病(Marek’sdisease)和传染性喉气管炎(laryngotracheitis)疫苗，这两种疾病都是家禽业中与动物福利和经营经济性高度相关的疾病。例如，在手册中，如“默克兽医手册”(2010，第10版，2010,C.M.Kahn编辑，ISBN:091191093X)和“家禽疾病”(2008，第12版，Y.Saif编辑，IowaState Univ.press,ISBN-10:0813807182)中对其进行了详细描述。

禽类喉气管炎是一种由传染性喉气管炎病毒(ILTV，也称为禽类(gallid)疱疹病毒1，或禽类(avian)疱疹病毒1)引起的家禽呼吸道疾病。ILTV属于α疱疹病毒(alphaherpesvirinae)亚科的传染性喉气管炎病毒(Iltovirus)属。感染会导致呼吸窘迫，并伴有流血和渗出的血性渗出物。ILTV感染蔓延迅速，并可能影响高达100％的感染鸡群。该疾病可能导致产蛋量减少、体重减轻、对继发性感染敏感性增加以及甚至普遍死亡率。存在用于ILTV的减毒活疫苗，但这些疫苗具有残留毒力或转化为毒力的潜在危险。最近，已描述了基于载体的疫苗，如Innovax^TM-ILT，如下所示。

马立克氏病是一种高度传染性家禽疾病，其在世界范围内广泛存在。这种疾病的典型体征是在一些器官和神经中出现T细胞淋巴瘤。这可能导致多种症状，其中包括麻痹和死亡，而且还会造成产蛋损失和屠宰销毁。马立克氏病由马立克氏病病毒(MDV)引起，该病毒属于α疱疹病毒亚科的马立克病毒属。

根据生物学和血清学性质，已将MDV在分类学上分类为三种主要的血清型：MDV血清型1(MDV1)，也称为禽类(gallid)疱疹病毒2，其是导致马立克氏病的主要原因，因为其对家禽具有致癌作用，并且已描述了从轻度到非常强毒的不同病理类型。已开发了用于减毒活病毒疫苗的减毒MDV1毒株，MDV1毒株的实例是RB1B、814和CVI-988Rispens(Cui等，2013,PLoS One,vol.8:e53340)，例如，在Nobilis^TM Rismavac(MSD Animal Health)中。

MDV血清型2(MDV2)，也称为禽类疱疹病毒3，对家禽的致病性很小。已开发了活疫苗毒株，例如，基于毒株SB1(Petherbridge等，2009,J.Virol.Meth.,vol.158,p.11)，例如，在Nobilis^TM Marexine SB1(MSD Animal Health)中。

最后，MDV血清型3，也称为火鸡(meleagrid)疱疹病毒1，但通常称为：火鸡疱疹病毒(HVT)。在1970年首次对HVT进行了描述(Witter等，1970,Am.J.Vet.Res.,vol.31,p.525)，并且其是无致病性的。然而，有趣的是，接种HVT可针对血清型1和2MDV提供交叉保护性免疫，使得这种病毒自然适合作为针对MDV 1和2的活疫苗的基础。结果，目前在农业上几乎对每只新生雏鸡都接种了HVT疫苗，导致全世界每年注射多达50亿剂HVT疫苗。