[发明专利]产生T细胞组合物的方法

权利要求书

1.一种用于产生工程化细胞的组合物的方法，所述方法包括：

(a)在刺激条件下孵育包含原代人T细胞的输入组合物，所述刺激条件包括以下的存在：(i)能够激活TCR复合物的一种或多种组分的一个或多个细胞内信号传导结构域和/或一种或多种共刺激分子的一个或多个细胞内信号传导结构域的刺激试剂和(ii)抑制mTOR活性的药剂，其中所述抑制mTOR活性的药剂是选自2-(3-羟基苯基)-9-(2-异丙基苯基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-6-甲酰胺(化合物63)、6-(4-(2H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2(3H)-酮(化合物155)、或7-(6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-3-基)-1-((1r,4r)-4-甲氧基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮(化合物246)；以及

(b)将重组受体引入所述经刺激组合物中，从而生成包含工程化T细胞的工程化组合物。

2.根据权利要求1所述的方法，所述方法包括进一步孵育所述工程化细胞，其中所述孵育包括存在所述抑制mTOR活性的药剂，从而产生输出组合物。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述进一步孵育是在一种或多种重组细胞因子存在下进行。

4.根据权利要求2或权利要求3所述的方法，其中所述进一步孵育包括在导致所述组合物中细胞的增殖或扩增的条件下培育。

5.一种用于产生工程化细胞的组合物的方法，所述方法包括在抑制mTOR活性的药剂存在下培育包含包括用重组受体工程化的T细胞的经富集原代人T细胞的工程化细胞组合物；

其中所述抑制mTOR活性的药剂选自2-(3-羟基苯基)-9-(2-异丙基苯基)-8-氧代-8,9-二氢-7H-嘌呤-6-甲酰胺(化合物63)、6-(4-(2H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡嗪-2(3H)-酮(化合物155)或7-(6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-3-基)-1-((1r,4r)-4-甲氧基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮(化合物246)；并且

其中所述方法导致所述组合物中细胞的增殖或扩增以产生包含工程化T细胞的输出组合物。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，在所述培育之前，所述方法进一步包括：

(a)在刺激条件下、在抑制mTOR活性的药剂存在下孵育包含原代T细胞的输入组合物，其中所述刺激条件包括存在能够激活TCR复合物的一种或多种组分的一个或多个细胞内信号传导结构域和/或一种或多种共刺激分子的一个或多个细胞内信号传导结构域的刺激试剂，从而生成经刺激组合物；并且其中所述抑制mTOR活性的药剂是化合物63、化合物155或化合物246；以及

(b)将重组受体引入所述经刺激组合物中，从而生成包含工程化T细胞的工程化组合物。

7.一种用于产生工程化细胞的组合物的方法，所述方法包括在抑制mTOR活性的药剂存在下培育包含包括用重组受体工程化的细胞的原代人T细胞的工程化细胞组合物，其中所述组合物中的细胞在培育之前尚未暴露于所述药剂；并且

其中所述方法导致所述组合物中的所述细胞的增殖或扩增以产生包含工程化T细胞的输出组合物。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述原代T细胞是CD4+和/或CD8+T细胞。

9.根据权利要求5-8中任一项所述的方法，其中所述工程化T细胞组合物包含经富集CD4+T细胞。

10.根据权利要求5-8中任一项所述的方法，其中所述工程化T细胞组合物包含经富集CD8+T细胞。