[发明专利]启动子多核苷酸、信号多肽以及其用途

说明书

本发明涉及一种启动子多核苷酸、信号多肽和将其编码的多核苷酸以及其用途。包括启动子多核苷酸和编码信号多肽的多核苷酸的载体和宿主细胞可以有效地表达和/或在细胞外分泌外源蛋白质。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2017年12月29日提交的韩国专利申请号10-2017-0184819的优先权和权益,其通过引用合并于此用于所有目的,如同在此完全阐述一样。

技术领域

本发明涉及一种启动子多核苷酸、信号多肽以及其用途。

背景技术

作为用于重组表达的宿主，诸如细菌、酵母和真菌等的微生物正变得越来越重要。

诸如乳杆菌属(Lactobacillus)或链球菌属(Streptococcus sp.)的细菌可以用作递送工具。通常被认为安全的GRAS(Generally Recognized As Safe)微生物可以施用于人类或动物。

为了在乳酸菌中实现高水平的外源产物表达，需要可以从乳酸菌中分离并以高水平表达和分泌外源产物，特别是蛋白质的新型启动子和信号多肽。

发明内容

本发明一方面提供一种分离的启动子。

本发明另一方面提供一种重组多核苷酸，其包括所述启动子。

本发明另一方面提供一种宿主细胞，其包括所述重组多核苷酸。

本发明另一方面提供一种使用所述宿主细胞生产产物的方法。

本发明另一方面提供一种分离的信号多肽和将其编码的多核苷酸。

本发明另一方面提供一种重组多核苷酸，其包括编码所分离的信号多肽的多核苷酸。

本发明另一方面提供一种宿主细胞，其包括编码所分离的信号多肽的重组多核苷酸。

本发明另一方面提供一种使用宿主细胞生产蛋白质的方法，其中，所述宿主细胞包括编码所分离的信号多肽的重组多核苷酸。

附图说明

通过与附图结合来考虑,这些或/其他方面将根据具体实施例的以下描述变得显而易见且更容易理解。

图1为大肠杆菌和乳酸菌之间的穿梭载体pMT48的结构图。

图2为pMT54-PR4-IL10-SP4载体的结构图。

图3为在用pMT54-PR4-IL10-SP4载体转化三种乳酸菌后确认细胞外表达水平的结果。

图4为在用pMT54-PR4-amylase-SP4载体转化LMT1-21菌株后确认细胞外表达水平的结果。

图5为通过测量pMT54-P11-IL10-SP4和pMT54-PR4-IL10-SP4载体中IL-10的mRNA水平来比较启动子强度的结果。

图6为通过确认由用pMT54-PR4-IL10-SP4和pMT54-PR4-IL10-USP45转化的LMT1-21分泌的IL-10的量来比较信号肽强度的结果。

具体实施方式

本发明一方面提供一种分离的启动子，其包括与SEQ NO.1(以下也称为“PR4启动子”)的核苷酸序列具有至少85％的序列同源性的多核苷酸。