[发明专利]CDKL5表达变体和CDKL5融合蛋白

说明书

提供了新颖的CDKL5酶变体、以及包含全长CDKL5多肽或CDKL5变体的融合蛋白。此类融合蛋白可以包括细胞穿透多肽和任选地包含前导信号多肽和/或标签。还提供了产生此类CDKL5变体和融合蛋白的方法、以及此类重组蛋白的药物组合物、治疗方法和用途。

技术领域

本发明总体上涉及激酶缺陷障碍的治疗，特别是用于治疗涉及CDKL5缺陷的新颖重组蛋白。

背景技术

CDKL5是丝氨酸/苏氨酸激酶，之前被称为STK9。所述基因突变最近与许多神经障碍相关联，例如精神发育迟缓、沟通和运动技能丧失、婴儿痉挛和癫痫、非典型Rett综合征和X-连锁West综合征。X-连锁基因细胞周期蛋白依赖激酶样5(CDKL5)的突变或缺失已显示引起伴随早发型严重神经损害和难治性癫痫发作的癫痫性脑病。

目前，医学文献中描述的已知患有CDKL5缺陷的年龄最大的人已经达到41岁。其他许多人都是二十几岁或十几岁，但由于这种疾病是在过去15年才被发现的，大多数新确诊的是幼儿或婴儿。被诊断患有CDKL5缺陷的个体通常患有神经发育迟缓，并且癫痫发作风险高，发病年龄中位数为6周。一项针对111名参与者的研究发现，85.6％的个体患有癫痫发作每日出现的癫痫，且平均每日癫痫发作6次。

当前的治疗方法包括癫痫发作药物、生酮饮食、迷走神经刺激和手术。通常施用的抗癫痫药物包括氯巴占、丙戊酸和托吡酯，并且在许多情况下，同时使用两种或多种药物方案。个体似乎具有“蜜月期”，在开始一种新型的药物后一段时间，他们的癫痫不发作，但最终癫痫会复发。观察到的蜜月期的持续时间范围从2个月到7年，中位数为6个月。例如，所述研究发现111名参与者中有16人目前没有癫痫发作，其中一人从未出现癫痫发作。

致病表现的确切机制尚不清楚。一些实验数据表明，C-末端某些无义突变导致蛋白组成性地定位至细胞核，而其他错义突变在细胞质中具有高度代表性。核定位信号和核输出信号均在蛋白C-末端被鉴定。

一些突变酶变体导致磷酸化功能的部分或全部丧失，而其他突变和截短导致磷酸化能力的增加，这表明功能的丧失和获得都可能是致病的。由于酶活性丧失/功能增加和酶核定位以及酶在细胞质中的停留而引起的相互作用和致病作用尚不清楚。患有广泛CDKL5突变且呈现临床症状的患者的分析表明，导致临床症状的突变更容易在C-末端或激酶活性结构域中发现，这表明CDKL5的激酶活性和蛋白易位能力均可能影响症状的临床表现。

发明内容

因此，本发明的各个方面涉及新颖的CDKL5变体和CDKL5融合蛋白，其可用于治疗CDKL5-介导的神经障碍，例如CDKL5缺陷或由CDKL5突变或缺陷引起的非典型Rett综合征。本发明的其他方面涉及产生此类CDKL5变体和融合蛋白的方法，以及此类重组蛋白的药物组合物、治疗方法以及用途。

本发明的一个方面涉及如本文所述的CDKL5多肽。在一个或多个实施例中，所述CDKL5多肽包含与SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12具有至少98％的序列一致性的序列。在一个或多个实施例中，所述CDKL5多肽包含与SEQ IDNO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12具有至少99％的序列一致性的序列。在一个或多个实施例中，所述CDKL5多肽包含与SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12具有100％的序列一致性的序列。