[发明专利]α-淀粉酶、组合物和方法

权利要求书

1.一种具有α-淀粉酶活性的多肽，所述多肽选自由以下组成的组：

(a)包含氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列优选

与SEQ ID NO:3的多肽具有至少91％同一性；

(b)包含氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列优选

与SEQ ID NO:3的催化结构域具有至少91％同一性；

(c)包含氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列优选

与SEQ ID NO:3的接头和催化结构域具有至少91％同一性；

(d)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸优选至少在低严格条件下、更优选至少在中严格条件下、甚至更优选至少在中高严格条件下、最优选至少在高严格条件下和甚至最优选至少在极高严格条件下与以下项杂交

(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列，

(ii)包含SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列，或者

(iii)(i)或(ii)的全长互补链；

(e)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸包含与SEQ ID NO:3的多肽编码序列优选具有至少91％同一性的核苷酸序列；

(f)变体，所述变体包含SEQ ID NO:3的多肽的一个或多个(例如，几个)氨基酸的取代、缺失和/或插入；

(g)在从表达宿主分泌过程中通过信号肽酶或翻译后修饰对SEQ ID NO:2的多肽进行加工而产生的成熟多肽；和

(h)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)或(g)的多肽的片段，所述片段具有α-淀粉酶活性。

2.一种多核苷酸，所述多核苷酸包含编码如权利要求1所述的多肽的核苷酸序列。

3.一种载体，所述载体包含有效地连接至一个或多个控制序列的如权利要求2所述的多核苷酸，所述控制序列控制所述多肽在表达宿主内的产生。

4.一种重组宿主细胞，所述重组宿主细胞包含如权利要求2所述的多核苷酸。

5.如权利要求4所述的宿主细胞，所述宿主细胞是产乙醇微生物。

6.如权利要求4或5所述的宿主细胞，所述宿主细胞进一步表达和分泌一种或多种选自下组的另外的酶，该组包含：蛋白酶、半纤维素酶、纤维素酶、过氧化物酶、脂解酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、过水解酶、角质酶、果胶酶、果胶酸裂合酶、甘露聚糖酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质素酶、葡糖淀粉酶、支链淀粉酶、植酸酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、malanase、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、转移酶或其组合。

7.一种组合物，所述组合物包含如权利要求1所述的多肽。

8.如权利要求7所述的组合物，所述组合物进一步包含蛋白酶、半纤维素酶、纤维素酶、过氧化物酶、脂解酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、过水解酶、角质酶、果胶酶、果胶酸裂合酶、甘露聚糖酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质素酶、葡糖淀粉酶、支链淀粉酶、植酸酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、malanase、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、转移酶或其组合。

9.一种产生具有α-淀粉酶活性的多肽的方法，所述方法包括：

(a)在有利于产生所述多肽的条件下培养如权利要求4所述的宿主细胞；和

(b)回收所述多肽。

10.一种使用如权利要求1所述的具有α-淀粉酶活性的多肽处理含淀粉材料的方法。

11.一种糖化淀粉底物的方法，所述方法包括

a)将所述淀粉底物与如权利要求1所述的具有α-淀粉酶活性的多肽接触；和

b)糖化所述淀粉底物以产生包含葡萄糖的糖类物质。

12.如权利要求11所述的方法，其中糖化所述淀粉底物产生高葡萄糖糖浆。