[发明专利]分泌IL-36的免疫应答细胞及其用途

说明书

本公开提供了用于增强针对癌症和病原体的免疫应答的方法和组合物。本发明涉及包括抗原识别受体(例如，嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR))、并表达水平升高的IL‑36的免疫应答细胞。在某些实施方式中，改造的免疫应答细胞是抗原导向的，并具有增强的免疫激活特性。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2017年11月14日提交的美国临时申请号62/585,879的优先权，其全部内容通过引用合并于此，并要求其优先权。

技术领域

本公开的主题提供了用于增强针对癌症和病原体的免疫应答的方法和组合物。本发明涉及免疫应答细胞，其包括经工程改造表达IL-36多肽的抗原识别受体(例如，嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR))。这些改造的免疫应答细胞是抗原导向的，促进其他细胞因子的募集并显示出增强的抗靶标功效。

背景技术

尽管目前有可用的疗法，大多数成人B细胞恶性肿瘤，包括急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性淋巴细胞性白血病和非霍奇金淋巴瘤仍无法治愈。基因改造的自体T细胞的过继治疗已显示出对黑色素瘤和惰性B细胞恶性肿瘤的治疗功效的证据。通过引入编码对这些抗原特异的人工T细胞受体(称为嵌合抗原受体(CAR))的基因，可以修饰T细胞以靶向肿瘤相关抗原。免疫疗法是一种靶向疗法，具有提供治疗癌症的潜力。

然而，恶性细胞会适应产生免疫抑制性微环境，以保护自身免受免疫识别和消除。这种“敌对”的肿瘤微环境对涉及刺激免疫应答的治疗方法(例如靶向T细胞疗法)提出了挑战。为了改善CAR-或TCR-改造的T细胞的抗肿瘤作用，已经进行了各种修饰。例如，Pegram等人描述了组成型分泌白介素12(IL-12)的CAR-改造的T细胞的小鼠模型，显示出对CD19⁺肿瘤细胞的细胞毒性增加(Pegram等人,BLOOD,第119卷,第18期,2012)。然而，IL-12的分泌导致白介素2(IL-2)的抑制，白细胞介素2(IL-2)是一种重要的细胞因子，其促进T和B淋巴细胞的增殖和抗肿瘤作用。Dotti等人公开了组成型分泌白介素15(IL-15)和基于诱导型胱天蛋白酶9的自杀基因(iC9)的CAR改造的T细胞，其显示出对CD19⁺肿瘤细胞的细胞毒性增加(US 20130071414 A1)。该修饰的CAR-T细胞在体内和体外均显示出不变的IL-2表达水平。因此，迫切需要用于治疗肿瘤的新的治疗策略。

发明内容

本公开的主题提供了(a)表达针对所关注的靶抗原的抗原识别受体(例如，CAR或TCR)和(b)表达(并分泌)白介素36(“IL-36”)多肽(例如，IL-36α、IL-36β和/或IL-36γ)的免疫应答细胞(例如，T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞、自然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、自然杀伤T(NK-T)细胞或调节性T细胞)。在某些非限制性实施方式中，免疫应答细胞包括以可表达形式编码IL-36多肽的核苷酸(例如，编码IL-36多肽的核酸)。

本公开的主题还提供了免疫应答细胞，其包括(a)针对所关注的靶抗原的抗原识别受体(例如，CAR或TCR)，和(b)在内源性(天然)IL-36基因座的修饰的启动子，其中修饰的启动子增强内源性IL-36基因座的基因表达。在某些非限制性实施方式中，修饰包括将内源性启动子用组成型启动子或诱导型启动子替换，或将组成型启动子或诱导型启动子插入内源性IL-36基因座的启动子区域。在某些非限制性实施方式中，组成型启动子选自CMV启动子、EFla启动子、SV40启动子、PGK1启动子、Ubc启动子、β-肌动蛋白启动子和CAG启动子。在某些非限制性实施方式中，诱导型启动子选自四环素应答元件(TRE)启动子和雌激素应答元件(ERE)启动子。