[发明专利]视网膜色素上皮细胞组合物

说明书

本文提出了即时施用(RTA)视网膜色素上皮细胞(RPE)细胞疗法组合物，用于治疗视网膜退行性疾病和损伤。还提出了配制用于在解冻后直接施用给受试者的人RPE细胞的方法以及配制用于冷冻保存的RPE细胞疗法组合物并在解冻后将冷冻保存的组合物施用给受试者的方法。在另一方面，可以将RTA组合物配制成解冻和注射(TAI)组合物，由此在解冻后通过注射施用组合物。

相关申请的交叉引用

本申请要求2017年12月29日提交的美国临时专利申请号62/612,210的权益，其全部内容通过引用并入本文。

背景技术

视网膜色素上皮(RPE)是单层的神经上皮衍生的色素细胞，位于光感受器外部区段(POS)和脉络膜脉管系统之间的Bruch膜上。RPE单层对于光感受器的功能和健康至关重要。视网膜色素上皮(RPE)细胞的功能障碍、损伤和丧失是某些眼部疾病和病症的突出特征，例如年龄相关的黄斑变性(AMD)、遗传性黄斑变性，包括Best疾病(卵黄状黄斑营养不良的早期发作形式)，和色素性视网膜炎(RP)的亚型。将RPE(和光感受器)移植到患有此类疾病的人的视网膜中可以用作其中RPE已经变性的视网膜疾病的细胞替代疗法。

人类的胎儿和成人的RPE已经用作同种异体移植的供体来源。但是，在获得足够的组织供应方面的实际问题以及有关使用来自流产胎儿的组织的伦理问题限制了这些供体来源的广泛使用。鉴于成人和胎儿RPE移植物的供应有限，已经研究了替代供体来源的可能性。

人多能干细胞作为用于移植的RPE细胞来源具有明显的优势。它们的多能发育潜力使其能够分化为真正的功能性RPE细胞，并考虑到其无限自我更新的潜力，它们可以作为RPE细胞的无限供体来源。确实，已经证明人胚胎干细胞(hESC)和人诱导的多能干细胞(iPSC)可以在体外分化为RPE细胞，减轻视网膜变性，并在视网膜下植入后保留视觉功能。因此，hESC可以成为生产用于细胞疗法的RPE细胞的无限来源。

但是，大多数基于细胞的治疗通常冷冻保存在冷冻溶液中，这与直接向体内施用不相容，给临床使用带来了实际问题。细胞应在其解冻后数小时内移植，否则它们可能开始丧失生存力和质量。另外，必须在施用前在经过认证的设施中制备细胞，这些设施可能不靠近临床场所、医院或其他治疗设施。最后，由于认为最终制剂的制备是细胞疗法生产过程的一部分，因此必须由合格的技术人员来发布每个受试者的治疗剂量。

本公开内容解决了再生医学和RPE细胞疗法领域中的这些和其他缺点。

发明内容

在一方面，提出了用于治疗视网膜退行性疾病和损伤的即时施用(RTA)视网膜色素上皮(RPE)细胞疗法组合物。还提出了配制用于在解冻后直接施用给受试者的人RPE细胞的方法以及配制用于冷冻保存的RPE细胞疗法组合物并在解冻后将冷冻保存的组合物施用给受试者的方法。在另一方面，可以将RTA组合物配制成解冻和注射(TAI)组合物，由此在解冻后通过注射施用组合物。

在另一方面，提出了用于通过向受试者施用包含RPE细胞和即时施用的生物相容性冷冻保存介质的组合物来在受试者中实现以下一种或多种的方法：减慢视网膜退行性疾病的进展，减慢年龄相关的黄斑变性(AMD)和/或地图样萎缩(GA)的进展，预防视网膜退行性疾病，预防AMD，预防GA，恢复视网膜色素上皮(RPE)，增加RPE，替换RPE或治疗RPE缺陷。

本文描述的冷冻保存介质可以包含约2％的DMSO、5％的DMSO、约1％至约15％的DMSO、或约0.5％至约7％的DMSO、或约1.5％至约6.5％的DMSO、或约1.5％至约3％的DMSO、或约4％至约6％的DMSO。

在一些方面，冷冻保存介质包含：嘌呤核苷(例如，腺苷)、支链葡聚糖(例如，右旋糖酐-40)、两性离子有机化学缓冲剂(例如，HEPES(N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-(2-乙磺酸)))和细胞可耐受的极性非质子溶剂(例如，二甲基亚砜(DMSO))。