[发明专利]用模拟移动床进行的分离方法

说明书

本发明涉及在无需在EBA柱的出口处的泵的情况下以EBA‑SMB操作模式从液体进料混合物中分离一种或多种组分的方法。本发明还涉及具有膨胀床吸附柱的模拟移动床分离装置，其可以在根据本发明的方法中使用。

技术领域

本发明涉及在使用膨胀床吸附柱的模拟移动床装置中从混合物中分离至少一种组分的方法。本发明还涉及具有膨胀床吸附柱的模拟移动床分离装置。

背景技术

模拟移动床(SMB)装置已在Chin等人(2004)的综述论文(Chin CY和Wang N-H.L.(2004)《模拟移动床设备设计(Simulated Moving Bed Equipment Designs)》，在《分离和纯化综述(Separation and Purification Reviews)》，第33卷，第77-155页)中进行了描述。

在从混合物中分离组分时使用膨胀床柱已得到广泛研究，该研究强烈集中于生物大分子如蛋白质、肽、核酸和病毒颗粒的吸附/捕获纯化。实施EBA(膨胀床吸附)的一些主要动机包括：(1)在在基于细胞培养的料流和带有某些悬浮固体的料流的情况下减少预处理步骤，因为浑浊粘性料流可以流经EBA柱，而不会堵塞，且同时实现捕获目标分子；和(2)EBA柱的低或可忽略背压可以实现提高生产率的高流速。

EBA的原理和方法已经由Amersham Biosciences在《膨胀床吸附-原理和方法(Expanded Bed Adsorption-Principles and Methods)》(ISBN 18-1124-26)中和由Frej等人(2018)(K.A.-K.Frej和R.A.Hjorth(2018)，在《生物制药加工》(BiopharmaceuticalProcessing)中的“膨胀床吸附(Expanded Bed Adsorption)”，第13章，第269-277页(ISBN：978-0-08-100623-8)描述。

在来自Upfront的几项专利中已经描述由于EBA模式而在高流速下操作的优点，包括公开免疫球蛋白(一种特殊类型的蛋白质)纯化的WO98/08603，公开生物大分子(DNA、RNA、细菌、病毒)纯化的WO2004/082397，其描述在高流速和高温下纯化生物分子。

在专利文件EP 1994972中已经描述使用膨胀床柱在SMB装置中从混合物中分离有用成分的方法。特别地，此文件涉及从粗制农业和乳制品源(尤其是从土豆汁)中分离组分诸如蛋白质。

发明内容

根据本发明，使用带有膨胀床柱的SMB装置的分离过程的控制已被大大简化。特别地，可以操作过程，其中仅入口泵的存在就足以在SMB模式下稳定地操作EBA。

在迄今为止描述的EBA-SMB系统中，为了适当地控制柱中床的高度，需要在每个柱的入口和出口处的大量控制单元，例如包括形成出口控制单元的可移动接头、阀和泵的多个组件。出人意料地，发现该系统可以在减少形成控制单元的组件的情况下可靠地操作。特别地，发现系统可以在柱的出口端没有泵且没有可移动接头的情况下操作，并且在整个分离过程中仍可以保持稳定的流化床柱。

具体实施方式

根据一个特定的实施方式，本发明可以描述为在模拟移动床分离装置(“装置”)中从液体进料混合物比如含有悬浮固体的细胞悬浮液中分离至少一种组分的方法，其中分离产生产物出口料流且其中分离装置包括：

具有入口控制单元和出口控制单元的多个分离单元，通过该入口控制单元和出口控制单元，可以在每个分离单元中以向上流动建立混合物的液体流，从而为每个单元引入输入料流和输出料流；

其中分离单元的每个包括分离基质的膨胀床；

其中在多个步骤期间，可以保持通过多个分离单元的向上流动；和

其中分离单元的每个可涉及进料步骤、洗涤步骤、洗脱步骤、清洁步骤、平衡步骤或补偿步骤中的一个；