[发明专利]用于治疗肿瘤的药物组合物、药盒和方法

说明书

本发明公开了一种用于治疗对象中肿瘤的组合物，其包含治疗有效量的携带抑制量的靶向CTLA4的miRNA的外泌体和溶瘤病毒。其中，所述外泌体基序与所述靶向CTLA4的miRNA的种子序列可操作地连接以增强所述靶向CTLA4的miRNA包装至所述外泌体中。

技术领域

本发明涉及一种用于治疗肿瘤的药物组合物，特别涉及包含治疗有效量的携带靶向CTLA4的miRNA的外泌体和治疗有效量的溶瘤病毒的药物组合物。本发明还涉及一种包含携带靶向CTLA4的miRNA的外泌体和溶瘤病毒的药盒，以及使用所述药物组合物和所述药盒治疗肿瘤的方法。

背景技术

癌症作为一种疾病是多方面的敌人，它可以屈服于指定的治疗方法，也可以对各种疗法产生抵抗力。肿瘤内的细胞子集对常规治疗方式有抵抗力，并且可以导致疾病复发。

手术治疗癌症是常见的局部治疗。除了血液系统的某些恶性肿瘤（例如白血病，淋巴瘤等）外，其他各种恶性肿瘤还具有一种或多种可以通过手术移除的有形实体瘤。但是，手术总是有一定的风险，并且经常有其他并发症或潜在的器官功能障碍。

迄今为止，非手术治疗癌症（主要是常规化学疗法、靶向生物疗法和放射疗法）尚未取得完全令人满意的结果。持续存在的问题包括靶标选择性低、耐药性、无法有效解决转移性疾病和严重的副作用。相反，目前整体上激发宿主免疫力来诱导针对肿瘤的全身反应的免疫疗法提供了许多临床前景。

溶瘤病毒代表了一类新的治疗药物，其被设计为在癌细胞中选择性地复制并杀死癌细胞，使正常细胞免受其影响。众所周知，由于肿瘤相关抗原（TAA）、病原体相关分子模式（PAMPS）和危险相关分子模式（DAMPS）从裂解的肿瘤细胞释放，溶瘤病毒能够刺激对肿瘤细胞的适应性免疫反应。这些反应还将肿瘤从冷肿瘤（免疫沙漠型）转变为热肿瘤（免疫炎症型）。一旦被抗原呈递细胞（APC）处理，TAA然后能够诱导抗肿瘤T细胞反应与抗病毒反应同时发生。基于这些独特的特征，溶瘤病毒现在被认为是癌症免疫治疗剂。然而，仅溶瘤病毒治疗仍不能治愈体积大的和/或转移的肿瘤，因此溶瘤病毒还需要额外的治疗剂来增强其抗肿瘤作用。溶瘤病毒的另一个优势是能够被工程化以编码治疗基因，该基因能够进一步帮助该病毒的总体抗肿瘤功效。

溶瘤病毒分为DNA病毒和RNA病毒。DNA病毒以腺病毒、单纯疱疹病毒、细小病毒和牛痘病毒为主。RNA病毒包括呼肠孤病毒（reovirus）、柯萨基病毒（coxsackievirus）、脊髓灰质炎病毒（polio virus）、塞内卡谷病毒（Seneca valley virus）、麻疹病毒、新城疫病毒、水疱性口炎病毒等。理想的溶瘤病毒应该能够有效降低对患者和人群的风险。例如，溶瘤病毒对患者应该具有肿瘤选择性、正常组织非致病性、体内非持续性、遗传（基因）稳定性。除上述特征外，溶瘤病毒还应该是非传染性的，并且人群已经对该病毒具有广泛的免疫。

尽管在临床前和临床环境中进行了广泛的研究和测试，但用于治疗肿瘤的方法仍然存在未满足的需求。

概述

一方面，本发明公开了一种携带靶向CTLA4的miRNA的外泌体，其中外泌体包装相关的基序（下文中也指“外泌体基序”）被可操作地连接至靶向CTLA4的miRNA。在一个实施方案中，外泌体包含抑制量的靶向CTLA4的miRNA，其中靶向CTLA4的miRNA具有结合CTLA4的mRNA的种子序列；并且外泌体基序与靶向CTLA4的miRNA的种子序列可操作地连接以增强靶向CTLA4的miRNA包装至外泌体中。在一些实施方案中，外泌体基序位于靶向CTLA4的miRNA的种子序列的下游并与其共价连接。在一些实施方案中，外泌体基序位于靶向CTLA4的miRNA的种子序列的下游并通过连接子与其连接。在一些实施方案中，外泌体基序是通过突变靶向CTLA4的miRNA的除种子序列以外的一个或多个核酸而获得的。在一些实施方案中，外泌体基序是通过两个单个外泌体基序的组合产生的双倍基序。在一些实施方案中，当可操作地连接时，靶向CTLA4的miRNA与外泌体基序共享至少一个或两个核苷酸。