[发明专利]一种微反应器的实时荧光检测设备及其操作方法在审
申请号: | 201910001076.9 | 申请日: | 2019-01-02 |
公开(公告)号: | CN109406479A | 公开(公告)日: | 2019-03-01 |
发明(设计)人: | 张惠丹;戴敬;丁志文;虞晨辉 | 申请(专利权)人: | 苏州昊通仪器科技有限公司;苏州博睿义达生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/01 |
代理公司: | 成都佳划信知识产权代理有限公司 51266 | 代理人: | 尹志敏 |
地址: | 215000 江苏省苏州市工*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 微反应器 实时荧光检测 物镜调焦装置 滤光片组件 激发光源 探测器 成像光路 光源装置 生物芯片 视场光阑 合束镜 位移台 合束 电性连接 高灵敏度 实时检测 物镜组件 多通道 计算机 光路 光源 统一 | ||
1.一种微反应器的实时荧光检测设备,其特征在于,包括生物芯片、位移台、物镜组件、物镜调焦装置、滤光片组件、光源装置、成像光路组件、探测器和计算机,
所述生物芯片中放置有微反应器,所述生物芯片放置在位移台上且所述位移台活动设置,所述物镜组件放置在位移台下方,所述物镜调焦装置设置在物镜组件的下方,所述滤光片组件设置在物镜调焦装置的下方,所述探测器通过成像光路组件与滤光片组件连接,所述光源装置设置在所述滤光片组件侧边,所述计算机与位移台、物镜调焦装置、探测器电性连接;
所述光源装置包括激发光源、视场光阑和第一合束镜,所述激发光源的数量为多个,所述第一合束镜将每个所述激发光源的光源合束并形成统一光路,所述视场光阑设置在合束后的统一光路上。
2.根据权利要求1所述的微反应器的实时荧光检测设备,其特征在于,所述微反应器带有荧光特性,所述微反应器的结构包括油包水液滴结构、水包油液滴结构、微孔阵列结构和腔体结构。
3.根据权利要求1所述的微反应器的实时荧光检测设备,其特征在于,所述位移台内设置有用于控制生物芯片温度的加热装置。
4.根据权利要求1所述的微反应器的实时荧光检测设备,其特征在于,所述物镜组件、物镜调焦装置、滤光片组件和光源装置组成照明光路,所述生物芯片、位移台、物镜组件、物镜调焦装置、滤光片组件、成像光路组件和探测器组成成像光路。
5.根据权利要求4所述的微反应器的实时荧光检测设备,其特征在于,所述滤光片组件包括二向色镜和两个滤光片,两个所述滤光片分别对应照明光路和成像光路。
6.根据权利要求4所述的微反应器的实时荧光检测设备,其特征在于,所述滤光片组件为多组,每组所述滤光片组件分别与一激发光源对应。
7.根据权利要求1所述的微反应器的实时荧光检测设备,其特征在于,所述激发光源为四组,每组所述激发光源包括激光器和准直透镜,所述激光器与准直透镜匹配设置,所述准直透镜将所述激光器的光线准直。
8.根据权利要求1所述的微反应器的实时荧光检测设备,其特征在于,所述激发光源为四组,每组所述激发光源四组包括第二激发光源,每组所述第二激发光源包括激光器、准直透镜和若干个第二合束镜,所述激光器与准直透镜匹配设置,所述第二合束镜用于将每个激光器的光束合束。
9.根据权利要求1所述的微反应器的实时荧光检测设备,其特征在于,所述物镜调焦装置具有自动调焦功能。
10.一种权利要求1至9所述的微反应器的实时荧光检测设备的操作方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一:将处理好样本打进生物芯片1里,并且用介质稀释,保证微反应器不上下重叠,然后把芯片放置在位移台2上,所说的微反应器带荧光染料。
步骤二:根据微反应器里面所加的荧光染料,选择相应的激发波长和滤光片组件。
步骤三:打开探测器,通过物镜组件选择合适倍率的物镜。
步骤四:启动自动对焦功能,先后在边缘和对角线的位置上找到12个点,用计算机对焦算法得到最清晰的图像记录物镜的12个位置,用自小二乘法计算得到物镜的初始位置。
步骤五:通过调节位移台的位置,使得需要计数的微反应器放置在探测器8的拍摄区域;
步骤六:选择相应的曝光时间,拍摄图片。
步骤七:当拍摄区域大于探测器一次可拍摄的范围时,运用图像拼接的功能拍摄完成的图像;
步骤八:完成测试后,进行后续的图像处理和微反应器的计数,统计阴性和阳性的微反应器个数,并计算浓度。
步骤九:根据拍摄的范围选择不同的物镜倍率,或者根据荧光染料选择不同的激发光源,然后重复以上步骤三~八可拍摄相应的微反应器图像。
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