[发明专利]一株发光杆菌FC615及其培养方法与应用

权利要求书

1.一株发光杆菌Photobacterium sp. FC615，2018年12月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号CGMCC NO. 16918。

2.权利要求1所述的发光杆菌FC615菌液的培养方法，其特征在于，步骤如下：

（1）取发光杆菌FC615接种至液体培养基中，在温度为28～30℃、转数为150～300 rpm的条件下，摇床培养8～16小时，制得种子液；

（2）取步骤（1）制得的种子液，按5～10%的体积百分比接种于液体培养基中，在温度为28～30 ℃，溶氧为25～30%的条件下，扩大培养2～5小时，制得发光杆菌FC615菌液。

3.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述液体培养基每升组分如下：

胰蛋白胨5～15 g、酵母提取物3～8 g、海水素30~35g，水1000mL，pH值为6.5～7.5。

4.权利要求1所述的发光杆菌FC615在制备糖胺聚糖裂解酶中的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤如下：

（1）取发光杆菌FC615菌株接种至液体培养基中，在温度为28～30℃、转数为150～300rpm的条件下，摇床培养 8～16小时，制得种子液；

（2）取步骤（1）制得的种子液，按5～10%的体积百分比接种于液体培养基中，在温度为25～30℃，溶氧为25～30%的条件下，扩大培养2～5小时，加入硫酸软骨素，使硫酸软骨素的质量浓度为0.01～0.02%，继续培养24～72小时，制得发光杆菌FC615发酵液；

（3）取步骤（3）制得的发光杆菌FC615发酵液，经固液分离，取液体，加入硫酸铵，使硫酸铵质量浓度大于等于80%，收集沉淀，沉淀用PBS缓冲液进行透析去除硫酸铵，制得糖胺聚糖裂解酶。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤（1）和（2）所述液体培养基每升组分如下：

胰蛋白胨5～15 g、酵母提取物3～8 g、海水素30~35g，水1000mL，pH值为6.5～7.5。

7.如权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤（3）所述固液分离采用离心的方式，条件为：12,000 rpm离心15~30min。