[发明专利]一种治疗自身免疫疾病的间充质干细胞及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种治疗自身免疫病的间充质干细胞，所述间充质干细胞通过基因修饰的方法，特异表达人白介素17受体类似物，从而竞争性抑制IL‑17与IL‑17受体的结合。因此可用于抑制IL‑17介导的炎症相关信号通路以及炎症反应。本发明还公开了一种IL17RA融合蛋白以及所述间充质干细胞的制备方法和应用。

技术领域

本发明涉及一种通过阻断IL17/IL17R传导通路，抑制IL17通路介导的炎症反应，从而治疗相关自身免疫性疾病的间充质干细胞及其制备方法和应用，属于生物医药领域。

背景技术

人白介素17(hIL-17)是T辅助细胞TH17活化产生的一种促炎症细胞因子，可通过直接或间接诱导多种细胞因子、趋化因子、炎症因子和抗微生物蛋白来识别介导自身免疫和慢性感染的靶基因，因此在炎症反应、免疫调节、微生物与寄生虫感染方面起重要作用，在人细胞因子免疫调节网络中起关键调节作用。白介素-17(IL-17)已经发现的成员有6个，分别是：IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E(也被称为IL-25)和IL-17F。最新研究表明[1-2]，IL-17A(白细胞介素-17A)作为促炎症因子IL-17家族重要成员，与其膜表面受体IL-17RA(IL-17A受体)结合后可激活效应细胞的NF-kB等炎症信号通路，从而引起下游一系列炎症因子(包括TNF-a、Il-1β及IL-6等)释放和炎症发生；IL-17A通过诱导趋化因子的释放来诱导中性粒细胞募集至炎症部位，刺激前列腺素和金属蛋白酶产生、以及抑制蛋白多糖合成，同时IL-17A可进一步促进趋化因子CCL20、CXCL1、3、5、6、8及VEGF等分泌，进而导致免疫细胞异常分化、过度增殖和免疫细胞的激活。IL-17A也可以通过降低细胞间黏附因子的表达从而破坏细胞屏障[1,3]。IL-17A的受体由5个成员组成：IL-17RA、IL-17RB、IL-17RC、IL-17RD、IL-17RE[4]。IL-17RA是IL-17R家族中研究最多的分子，编码基因位于染色体22上，是由27个氨基酸的N-末端信号肽、287个氨基酸的胞外结构域、21个氨基酸的跨膜结构域和525个氨基酸异常长的胞质尾巴构成的单程跨膜蛋白[5]。IL-17RA广泛表达于多个组织器官，通过与IL-17A结合，诱导促炎细胞分泌趋化因子及炎性因子，参与组织重塑，参与急性期炎症反应。而最新开发的关节炎、银屑病治疗的新药中，Secukinumab、Brodalumab及Ixekizumab等单抗药物均针对IL-17/IL-17RA信号通路而研发，通过阻断IL-17A及其受体的结合从而抑制皮肤细胞的炎症反应，达到治疗银屑病的目的[1,6-7]。然而现有IL17阻断性抗体等药物在人体内半衰期较短，单一疗程内需要反复多次大剂量注射，从而增加了治疗成本和药物毒副作用的发生。另外，临床研究也发现，用上述单抗治疗病人时有少数患者出现严重不良事件，包括冠状动脉疾病，充血性心力衰竭，病毒综合征，尿路感染，手术伤口蜂窝织炎和肝酶水平升高，这种不良反应更多发于高血糖、高血压及高血脂的病人。另外，上述抗体在使用过程中在部分病人(4％)血清中检测出抗单抗的抗体，提示靶向药物的耐药性仍是单抗药物无法突破的难题。

基于此，亟需一种新的途径解决上述单抗的不足，用于制备治疗自身免疫性疾病(如炎症性肠病、银屑病及类风湿性关节炎等)的药物。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明的目的在于利用间充质干细胞对炎症部位的靶向作用及损伤部位的修复能力，通过基因修饰的方法，使间充质干细胞特异表达人白介素17受体类似物，通过竞争性抑制IL-17与IL-17受体的结合，从而达到阻断IL17信号通路、调节人体免疫细胞功能、降低机体炎症反应，修复损伤的组织器官，最终治疗例如IL17A/IL17RA介导的自身免疫性疾病的目的。