[发明专利]一种DNA-银纳米簇的合成及其在检测核酸剪切酶活性方面的应用在审
申请号: | 201910005601.4 | 申请日: | 2019-01-03 |
公开(公告)号: | CN109706215A | 公开(公告)日: | 2019-05-03 |
发明(设计)人: | 林大杰;王舜;金辉乐;黄亚齐 | 申请(专利权)人: | 温州大学 |
主分类号: | C12Q1/34 | 分类号: | C12Q1/34 |
代理公司: | 温州名创知识产权代理有限公司 33258 | 代理人: | 陈加利 |
地址: | 325000 浙江省温州市瓯海*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 银纳米簇 核酸剪切 合成 酶活性 配制 硼氢化钠溶液 酶活性测定 硝酸银溶液 方法使用 硼氢化钠 荧光效应 灵敏度 检测 称取 活化 制备 应用 冷却 直观 | ||
1.一种DNA-银纳米簇的合成方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将DNA放入离心机中以8000转/分钟的速度离心8分钟,把920uL的Tris-HNO3加入到DNA中使得它的浓度为5mM,然后将DNA溶液放入到80℃的恒温水浴锅中活化30s后,取出放入冰水浴中冷却,将冷却后的DNA溶液用移液枪转移至5mL的棕色瓶中;
(2)将配制好的5mM硝酸银溶液加入上述溶液,反应1h;
(3)称取0.001克的硼氢化钠用Tris-HNO3配制成25mM的溶液,把棕色瓶放在磁力搅拌器上搅拌的同时加入硼氢化钠溶液,搅拌10分钟后反应4-168小时,得到DNA-银纳米簇。
2.根据权利要求1所述的合成方法,其特征在于,所述DNA,硝酸银,硼氢化钠的加入用量比为1:9:9、1:15:15、1:21:21、1:27:27、1:33:33、1:39:39中的任意一种。
3.根据权利要求1所述的合成方法,其特征在于,所述的步骤(2)与步骤(3)中的反应温度为4℃-37℃。
4.一种根据权利要求1-3所述的合成方法制备的DNA-银纳米簇。
5.一种根据权利要求4所述的DNA-银纳米簇在检测核酸剪切酶活性方面的应用,其特征在于,检测方法包括如下步骤:
(1)取多组DNA-银纳米簇,都加入等量的配对DNA和Hg2+,控制酶的用量和反应温度,反应1h;
(2)以激发光波长460nm,PMT电压700V,荧光发射收集范围490-650nm,狭缝均为10nm,使用4mm×10mm的荧光比色皿,在室温条件下进行荧光检测。
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