[发明专利]一种定量测定儿茶素类物质的方法

权利要求书

1.一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)将二氯化锌和N-乙酰-L-半胱氨酸溶于超纯水中，在冰浴、常压下搅拌20分钟后用氢氧化钠溶液将溶液pH调为9.7，然后加入二氯化镉充氮气冰浴搅拌5分钟，加入NaHSe，搅拌5分钟，最后将此溶液放入反应釜中，在200℃的烘箱中反应65分钟；得到ZnCdSe量子点；

(2)将四-(4-吡啶基)锌卟啉溶于DMF中，超声溶解后置于4℃下备用；然后加入ZnTPyP的DMF溶液和十二烷基二甲基甜菜碱的水溶液，室温下搅拌10min后得到一种非常稳定的绿色透明胶体四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体纳米棒溶液；

(3)将四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体纳米棒溶液加入ZnCdSe量子点荧光探针，再加入pH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液，四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体纳米棒通过电子转移和荧光共振能量转移作用，猝灭量子点荧光，通过特异性结合得到的复合物，提供量子点一个“Turn-off”的状态，从而得到具有双重复合纳米效应的开关纳米卟啉荧光传感器；

(4)将不同标准浓度的儿茶素类物质分别加入到相同的开关纳米卟啉荧光传感器中，开关纳米卟啉荧光传感器中的量子点荧光恢复，不同标准浓度的儿茶素类化合物致使量子点荧光恢复的现象产生明显的差异，从而得到可逆“开-关-开”纳米卟啉荧光传感器；记录相关的现象；

或直接将步骤(3)和(4)合并：分别将不同标准浓度范围的儿茶素类化合物与步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体纳米棒溶液、pH＝8.0的Tris-HCl缓冲溶液混合，静置5分钟；再加入步骤(1)合成的ZnCdSe量子点，在400-550nm处进行荧光光谱测定，测得其5分钟后的光谱，记录相关的光谱；

(5)将待测浓度的儿茶素类物质溶液加入到与步骤(4)相同的开关纳米卟啉荧光传感器中，将得到的现象或光谱，同步骤(4)比较，得到相关的浓度。

2.根据权利要求书1所述的一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，二氯化锌、N-乙酰-L-半胱氨酸、二氯化镉、NaHSe的物质的量的比为：1.0:3.0:0.01:0.1。

3.根据权利要求书1所述的一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，ZnCdSe量子点荧光探针发射波长为465～480nm。

4.根据权利要求书1所述的一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，步骤(2)中四-(4-吡啶基)锌卟啉与十二烷基二甲基甜菜碱的物质的量比为1:14～16。

5.根据权利要求书1所述的一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，步骤(3)四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米棒与ZnCdSe量子点的物质的量比为277～280:1。

6.根据权利要求书1所述的一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，步骤(3)最后的混合溶液中四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装体纳米棒的浓度、ZnCdSe量子点浓度分别为0.84～5.04μmol/L、4.2×10^-9mol/L。

7.根据权利要求书1所述的一种定量测定儿茶素类物质的方法，其特征在于，用于生物基质中儿茶素类物质的微量检测。