[发明专利]一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液的制备方法在审
| 申请号： | 201910008225.4 | 申请日： | 2019-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN109511651A | 公开（公告）日： | 2019-03-26 |
| 发明（设计）人： | 王玉娟;张道强;刘传杰;王金环;徐矫健;葛淑娟;刘燕丽 | 申请（专利权）人： | 青岛麦迪赛斯生物科技有限公司 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 济南方宇专利代理事务所(普通合伙) 37251 | 代理人： | 俞波 |
| 地址： | 266100 山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 冻存液 无血清 制备 细胞 人脐带间充质干细胞 脐带间充质干细胞 血小板裂解液 常温下 海藻糖 母液 渗透性保护剂 基础培养基 体积百分比 蛋白多糖 动物病原 动物血清 毒性作用 时间维持 细胞暴露 存活率 原有的 渗入 替换 污染 安全 | ||
1.一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液，其特征在于：包括以下组成及其体积百分比：
基础培养基20-80%；
血小板裂解液5-30%；
速溶蛋白多糖母液1-10%；
海藻糖母液5-25%。
2.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液，其特征在于：包括以下组成及其体积百分比：
基础培养基58%；
血小板裂解液25%；
速溶蛋白多糖母液2%；
海藻糖母液15%。
3.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液，其特征在于：所述基础培养基为DMEM/F12，所述血小板裂解液来源于人脐带血，所述速溶蛋白多糖母液来源于螺旋藻。
4.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液，其特征在于：所述速溶蛋白多糖母液浓度为50mg/ml，所述海藻糖母液浓度为1mol/L。
5.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液，其特征在于：所述速溶蛋白多糖母液和海藻糖母液均经0.2μm滤膜过滤除菌。
6.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液的制备方法，其特征在于：包括以下制备方法：
S1、制备原料：取适量的F12培养基和DMEM培养基，按体积比为I:I进行混合，得到DMEM/F12培养基，从螺旋藻中提取出速溶蛋白多糖，并与纯净水混合，得到浓度为50mg/ml的速溶蛋白多糖母液，取适量的海藻糖与纯净水混合，得到浓度为1mol/L的海藻糖母液；
S2、过滤除菌：取适量的速溶蛋白多糖母液和海藻糖母液通过0.2μm滤膜进行过滤除菌；
S3、混合搅拌：取基础培养基20-80%倒入无菌试剂瓶内，然后取血小板裂解液5-30%倒入无菌试剂瓶内，最后取过滤后的速溶蛋白多糖母液1-10%和海藻糖母液5-25%倒入无菌试剂瓶内，通过血清移液管进行吹打混匀，得到人脐带间充质干细胞无血清冻存液。
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