[发明专利]一种西瓜隐性细胞核雄性不育紧密连锁的SSR分子标记及应用在审
| 申请号： | 201910009159.2 | 申请日： | 2019-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN109593874A | 公开（公告）日： | 2019-04-09 |
| 发明（设计）人： | 张显;魏春华;张锐敏 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人： | 董芙蓉 |
| 地址： | 712100 陕西省咸*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 西瓜 隐性细胞核雄性不育 紧密连锁 杂交育种 分子标记辅助选择 分子标记技术 雄性不育性状 雄性不育系 核苷酸序 西瓜生长 限制因素 雄花育性 雄性可育 育种周期 制种效率 重要意义 性状 引物 制种 应用 育种 开发 | ||
1.一种西瓜隐性细胞核雄性不育紧密连锁的SSR分子标记，其特征在于，所述SSR分子标记的核苷酸序列为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2；其中，SEQ ID NO.1所示核苷酸序列与西瓜隐性细胞核雄性可育性状高度连锁，SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列与西瓜隐性细胞核雄性不育性状高度连锁。
2.一种用于检测西瓜隐性细胞核雄性不育的引物对，其特征在于，所述引物对的核苷酸序列为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4。
3.一种用于检测西瓜隐性细胞核雄性不育的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求2所述的引物对。
4.一种权利要求1所述的SSR标记、权利要求2所述的引物对及权利要求3所述的试剂盒在西瓜育种中的应用。
5.一种检测西瓜隐性细胞核雄性不育的方法，其特征在于，通过检测待测西瓜是否含有权利要求1所述的SSR标记来确定西瓜雄花的育性。
6.根据权利要求5所述的一种检测西瓜隐性细胞核雄性不育的方法，其特征在于，具体包括：提取待测西瓜的基因组DNA；
利用权利要求2所述的引物对对西瓜基因组DNA进行PCR扩增，获得PCR扩增产物；
对所述PCR扩增产物进行测序，获得测序结果，或对所述PCR扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳显示结果，对比所述测序结果或凝胶电泳显示结果与权利要求1所述的SSR标记来确定待测西瓜雄花的育性。
7.根据权利要求6所述的一种检测西瓜隐性细胞核雄性不育的方法，其特征在于，所述PCR的扩增程序为：94℃，3min；94℃，30s；58℃，30s；72℃，20s，28cycles；72℃，5min。
8.根据权利要求6所述的一种检测西瓜隐性细胞核雄性不育的方法，其特征在于，通过所述测序结果来确定育性的具体操作为：当所述PCR扩增产物的核苷酸序列和SEQ ID N0.1序列一致，表示西瓜雄花为雄性可育性状；
当所述PCR扩增产物的核苷酸序列和SEQ ID N0.1序列不一致且与SEQ ID N0.2序列一致，表示西瓜雄花为雄性不育性状。
9.根据权利要求6所述的一种检测西瓜隐性细胞核雄性不育的方法，其特征在于，通过所述凝胶电泳显示结果来确定育性的具体操作为：当电泳条带位置和所述SEQ ID N0.1片段凝胶电泳条带一致，表示西瓜雄花为雄性可育性状；
当电泳条带位置和所述SEQ ID N0.1片段凝胶电泳条带不一致且与SEQ ID N0.2片段凝胶电泳条带一致，表示西瓜雄花为雄性不育性状。
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