[发明专利]一种检测A型塞内卡病毒的荧光定量PCR引物及试剂盒有效
| 申请号： | 201910013717.2 | 申请日： | 2019-01-07 |
| 公开（公告）号： | CN109652593B | 公开（公告）日： | 2022-03-22 |
| 发明（设计）人： | 郭慧琛;穆素雨;孙世琪;张韵;茹嘉喜;郭笑然;罗建勋;殷宏 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;马鑫 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 型塞内卡 病毒 荧光 定量 pcr 引物 试剂盒 | ||
1.一种检测A型塞内卡病毒（Senecavirus A，SVA）的荧光定量PCR引物，其特征在于，所述的引物是基于塞内卡病毒L/VP4区段基因序列设计的，其上游引物序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物序列如SEQ ID NO.2所示。
2.如权利要求1所述的荧光定量PCR引物在制备检测A型塞内卡病毒试剂中的用途。
3.一种检测A型塞内卡病毒的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中含有用于检测A型塞内卡病毒（Senecavirus A，SVA）的荧光定量PCR引物，所述的引物是基于塞内卡病毒L/VP4区段基因序列设计的，其上游引物序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物序列如SEQ ID NO.2所示。
4.如权利要求3所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中还含有RNA抽提试剂、逆转录反应液、荧光定量PCR反应液以及标准阳性DNA模版。
5.如权利要求4所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述的RNA抽提试剂为TRIzol试剂，所述的逆转录反应液为5×PrimeScript RT Master Mix，所述的荧光定量PCR反应液为TBGreen™
6.如权利要求5所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，标准阳性DNA模版的浓度分别为6.4×1010拷贝数/μL、6.4×109拷贝数/μL、6.4×108拷贝数/μL、6.4×107拷贝数/μL、6.4×106拷贝数/μL、6.4×105拷贝数/μL和6.4×104拷贝数/μL。
7.如权利要求3-6任一项所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，荧光定量PCR反应体系包括：荧光定量PCR反应液12.5μL，A型塞内卡病毒cDNA 2μL，上游引物 1μL，下游引物 1μL，DEPC水补足至25μL；
荧光定量PCR反应条件：95℃5秒，95℃15秒，60℃30秒，共40个循环。
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