[发明专利]一种替西罗莫司的分离纯化方法

权利要求书

1.一种替西罗莫司的分离纯化方法，其特征在于，它包括以下步骤：

（1）粗品的合成：

a.酰氯的制备：将2,2,5-三甲基-5-羧酸-1,3-二氧六烷溶解于正己烷，25±5℃下加入二氯亚砜，搅拌，减压浓缩至干，得酰氯；

b.成酯反应：将雷帕霉素、DIPEA与DCM混合，0-5℃下滴入步骤a所得酰氯，25±5℃下搅拌，浓缩蒸干，粗品用硅胶柱层析，洗脱得酯化物2,2,5-三甲基[1,3-二氧六烷]-5-羧酸-42-酯-雷帕霉素；所述硅胶柱中硅胶的目数为200-300目；所述层析使用的洗脱剂是石油醚：乙酸乙酯；

c.将步骤b酯化物溶解于THF，25±5℃下滴入硫酸水溶液，反应，调节pH至7-8，EA萃取，用干燥剂干燥，减压浓缩，得替西罗莫司粗品；

（2）分离纯化：将步骤c粗品溶解于乙醇-正庚烷，注入正向制备色谱柱，用流动相乙醇-正庚烷梯度洗脱，分段收集洗脱液，合并替西罗莫司纯度≥98%的洗脱液，减压干燥，得替西罗莫司纯品；

所述梯度洗脱程序为：0～25min，100%→50%正庚烷；25～70 min，50%→50%正庚烷；70-90min，50%→20%正庚烷；

所述正向制备色谱柱为：X2，规格4.6×250mm，10μm，型号 14011407Y。

2.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤a所述2,2,5-三甲基-5-羧酸-1,3-二氧六烷、正己烷与二氯亚砜的质量体积比为1g：14ml：1.37g；所述搅拌时间为12~15h；所述酰氯为无色油状液体。

3.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤b所述雷帕霉素、DIPEA和DCM的质量体积比为1g：0.72ml：2.83ml；所述滴入酰氯至酰氯浓度为0.75~1 g/ml；所述搅拌至雷帕霉素含量小于0.5%时止。

4.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，所述石油醚：乙酸乙酯体积比为1:1。

5.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤c所述酯化物、THF与硫酸水溶液的质量体积比1g：7.95ml：1.88ml；所述硫酸水溶液浓度为2 mol/L。

6.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤c所述反应时间为14h；所述调pH的试剂是饱和碳酸钠水溶液；所述干燥剂为无水硫酸钠。

7.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤（2）所述粗品与乙醇-正庚烷的质量体积比为0.2：1g/ml；所述乙醇-正庚烷体积比：0~8 ：1~2。

8.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤（2）所述正向制备色谱柱中流动相流速为1mL/min，柱温为30℃，波长为277nm。

9.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤（2）所述分段收集是从45min开始，每1min收集1次。