[发明专利]IL15Rα以及相关膜蛋白检测试剂盒及其应用有效
申请号: | 201910017996.X | 申请日: | 2019-01-09 |
公开(公告)号: | CN109781977B | 公开(公告)日: | 2022-03-29 |
发明(设计)人: | 张峥嵘;贺毅;孙作厘 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学附属北京安定医院 |
主分类号: | G01N33/535 | 分类号: | G01N33/535;G01N1/38;G01N21/31 |
代理公司: | 北京植德律师事务所 11780 | 代理人: | 唐华东 |
地址: | 100088*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | il15r 以及 相关 膜蛋白 检测 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种检测外周血中IL15Rα水平的试剂盒,所述试剂盒包括IL15Rα抗体、封闭缓冲液、样品处理液、IL15Rα标准品、洗涤缓冲液,其特征在于,所述样品处理液为比例为0.01%-0.125%NP40、0.2%-2.5%Triton X-100、0.02%-0.25%SDS的PBS缓冲液。
2.根据权利要求1所述试剂盒,其中所述IL15Rα抗体包括第一IL15Rα抗体和生物素化的第二IL15Rα抗体。
3.根据权利要求1或2所述试剂盒,所述封闭缓冲液为含有1%BSA的PBS。
4.根据权利要求1或2所述试剂盒,所述样品处理液为比例为0.05%NP40、0.1%SDS、1%Triton X-100的PBS缓冲液。
5.根据权利要求3所述试剂盒,所述样品处理液为比例为0.05%NP40、0.1%SDS、1%Triton X-100的PBS缓冲液。
6.根据权利要求1或2所述试剂盒,所述样品处理液还包含蛋白酶抑制剂。
7.根据权利要求1或2所述试剂盒,所述外周血为全血、血浆或血清。
8.一种检测IL15Rα的样品处理液,所述样品处理液为比例为0.01%-0.125%NP40、0.2%-2.5%Triton X-100、0.02%-0.25%SDS的PBS缓冲液。
9.根据权利要求8所述样品处理液,所述样品处理液为比例为0.05%NP40、1%TritonX-100、0.1%SDS的PBS缓冲液。
10.根据权利要求8或9所述样品处理液,所述样品处理液还包含蛋白酶抑制剂。
11.权利要求8-10任一项所述样品处理液在制备用于检测血液中神经系统相关的蛋白含量的试剂盒中的用途,其中所述神经系统相关的蛋白选自BACE1、NRG1、IL15Rα。
12.权利要求8-10任一项所述样品处理液在制备用于检测血液中IL15Rα含量的试剂盒中的用途。
13.权利要求8-10任一项所述样品处理液在制备用于检测全血、血浆或血清中神经系统相关的蛋白含量的试剂盒中的用途,其中所述神经系统相关的蛋白选自BACE1、NRG1、IL15Rα。
14.权利要求8-10任一项所述样品处理液在制备用于检测全血、血浆或血清中IL15Rα含量的试剂盒中的用途。
15.一种检测外周血中IL15Rα水平的方法,所述方法包括如下步骤:
(1)用IL15Rα抗体包被平板;
(2)用含有1%BSA的PBS进行封闭处理;
(3)用样品处理液稀释样品;
(4)稀释后的样品加入包被有IL15Rα抗体的孔中;
(5)洗涤后加入生物素标记的IL15Rα抗体;
(6)孵育后加入HRP标记的亲和素孵育,经过彻底洗涤后用底物显色;
(7)用酶标仪在570nm波长下测定吸光度,450nm测吸光度作为参考波长,根据标准曲线计算样品浓度;
其中,所述样品处理液为比例为0.01%-0.125%NP40、0.02%-0.25%SDS、0.2%-2.5%Triton X-100的PBS缓冲液。
16.根据权利要求15所述方法,所述样品处理液为比例为含有0.05%NP40、0.1%SDS、1%Triton X-100的PBS缓冲液。
17.根据权利要求15或16所述方法,所述样品处理液还包含蛋白酶抑制剂。
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