[发明专利]单酶催化制备阿魏酸和木糖的方法有效
| 申请号： | 201910020863.8 | 申请日： | 2019-01-09 |
| 公开（公告）号： | CN109868292B | 公开（公告）日： | 2021-01-12 |
| 发明（设计）人： | 辛凤姣;曹浩;温博婷;王凤忠;孙丽超;谢莹莹;谷天一 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院农产品加工研究所 |
| 主分类号： | C12P7/42 | 分类号： | C12P7/42;C12P19/02;C12N9/24;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 催化 制备 阿魏酸 方法 | ||
1.单酶催化制备阿魏酸和木糖的方法，其特征在于，包括：
以天然木聚糖为酶解底物，加入双功能木聚糖水解酶，在40～80℃下反应20～60h，得酶解液，从酶解液中分离木糖和阿魏酸；
所述双功能木聚糖水解酶在NCBI数据库中的编号为WP014043093。
2.如权利要求1所述的单酶催化制备阿魏酸和木糖的方法，其特征在于，所述双功能木聚糖水解酶为Caldicellulosiruptor lactoaceticus来源。
3.如权利要求1所述的单酶催化制备阿魏酸和木糖的方法，其特征在于，以5～15wt％天然木聚糖为酶解底物，加入50～500U/mL的双功能木聚糖水解酶，在55～75℃下反应24～48h，得酶解液，从酶解液中分离木糖和阿魏酸。
4.如权利要求1所述的单酶催化制备阿魏酸和木糖的方法，其特征在于，所述双功能木聚糖水解酶的制备方法包括：根据双功能木聚糖水解酶基因构建重组质粒，将重组质粒转化进入宿主，得到表达双功能木聚糖水解酶的基因工程菌，培养、诱导基因工程菌，从培养液中分离出双功能木聚糖水解酶。
5.如权利要求3所述的单酶催化制备阿魏酸和木糖的方法，其特征在于，所述双功能木聚糖水解酶的制备方法包括：根据双功能木聚糖水解酶基因构建重组质粒，将重组质粒热激转化进入大肠杆菌宿主，得到表达双功能木聚糖水解酶的基因工程菌，将基因工程菌于37℃培养，当菌液OD600值达到0.8时，降温至18℃，在18℃条件下，使用异丙基硫代吡喃半乳糖苷诱导12h，用高压均质法破碎菌体，将菌液上清依次过亲和层析柱和分子筛，得双功能木聚糖水解酶酶液。
6.如权利要求1所述的单酶催化制备阿魏酸和木糖的方法，其特征在于，所述天然木聚糖包括麦糟、麦麸或玉米芯。
7.如权利要求1所述的单酶催化制备阿魏酸和木糖的方法，其特征在于，在酶解之前，用乙醇或乙酸钾对天然木聚糖进行预处理。
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