[发明专利]一种c-di-AMP合成酶单克隆抗体的重链和轻链可变区基因和编码的多肽及其应用

说明书

本发明涉及一种c‑di‑AMP合成酶单克隆抗体的重链和轻链可变区基因和编码的多肽及其应用。其重链可变区基因具有SEQ ID NO.1的序列，轻链可变区基因具有SEQ ID NO.3的序列。其重链可变区基因编码多肽具有SEQ ID NO.2的序列，其轻链可变区基因编码多肽具有SEQ ID NO.4的序列。具有上述可变区基因编码多肽的单克隆抗体DisA‑1B8与Rv3586的亲和力高，能够特异性识别不同分枝杆菌中的c‑di‑AMP合成酶，而不识别其他菌属细菌的该酶，具有较好的特异性。本发明所述的基因及其编码的多肽作为制备结核分枝杆菌及其他分枝杆菌感染的试剂、疫苗和药物的应用。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，涉及免疫学和分子生物学相关领域。特别涉及一种抗c-di-AMP合成酶的单克隆抗体的重链和轻链可变区基因和编码的多肽，以及所述基因和编码的多肽作为制备结核分枝杆菌及其他分枝杆菌感染的试剂、疫苗和药物的应用。

背景技术

1、细菌信号分子c-di-AMP及其功能

小分子环状核苷酸作为细菌第二信号分子被认为是细菌学研究领域里程碑式的发现。细菌通过调节环腺苷酸(Cyclic Adenosine monophosphate，cAMP)、鸟苷四磷酸(guanosine tetraphosphate，ppGpp)、环二鸟苷酸(Cyclic diguanosine monophosphate，c-di-GMP)等，调节包括细菌生长、营养摄取、细菌动力、生物被膜形成及致病性等一系列的生理过程(Gomelsky,M.,cAMP,c-di-GMP,c-di-AMP and now cGMP:bacteria use themall！Mol Microbiol,2011.79(3):p.562-5.)。

环二腺苷酸(Cyclic di-adenosine monophosphate，c-di-AMP)是2008年新发现的小分子核苷酸类信号分子，仅存在于细菌中，真核细胞中未发现该类核苷酸。多个多项研究报道，c-di-AMP参与调控细菌DNA损伤监控、细菌生长、细胞壁稳态、脂肪酸合成、离子转运以及细菌毒力生理过程。此外，研究发现c-di-AMP还可诱导宿主固有免疫应答，诱导宿主细胞自噬，激活炎症小体。c-di-AMP作为黏膜佐剂，与抗原联合免疫小鼠能够诱导高水平的Th1/Th2/Th17适应性免疫应答，并可直接促进抗原提呈细胞成熟，并且被认为是固有免疫应答中新发现的病原体相关的分子模式(pathogen-associated molecular patterns，PAMPs)。因此，c-di-AMP成为细菌性药物和疫苗研究中的新靶点(Commichau FM,HeidemannJL,Ficner R,Stülke J.Making and breaking of an essential poison:the cyclasesand phosphodiesterases that produce and degrade the essential secondmessenger cyclic di-AMP in bacteria.2018 Sep 17.pii:JB.00462-18.doi:10.1128/JB.00462-18.)。

2、c-di-AMP合成酶