[发明专利]元宝枫油提取神经酸的方法

说明书

本发明涉及药用植物成分提取技术领域，尤其涉及一种元宝枫油提取神经酸的方法，将元宝枫毛油除去杂质；再进行脱酸处理，将元宝枫油进行酯交换反应，用石油醚萃取；得混和脂肪酸；混和脂肪酸与尿素、体积浓度95％乙醇混合，得到脲包混合液，冷藏、冷冻。低温干燥得到神经酸粗品；硅胶柱层析分离、反复冷冻结晶纯化即得神经酸纯品。本发明提供的元宝枫油提取神经酸的方法，采用元宝枫油作为原料，元宝枫油中神经酸含量达5.5％，提取原料来源广泛并且成本低廉，与深海鲨鱼油相比元宝枫油是可持续利用的神经酸新资源。本发明的提取方法操作简单、提取率高、适用于工业化生产。

技术领域

本发明涉及药用植物成分提取技术领域，尤其涉及一种元宝枫油提取神经酸的方法。

背景技术

神经酸(Nervoic Acid)是一种长链不饱和脂肪酸，由于其主要来源于深海鲨鱼及鲨鱼油，亦称鲨鱼酸。化学名为顺15-二十四碳烯酸，分子式为C₂₄H₄₆O₂，分子量为366.6，白色粉状固体。神经酸最早发现于哺乳动物的神经组织，在神经组织和脑组织中含量较高，亦存在于视网膜及精液之中，是生物膜的重要组成部分，通常以鞘糖脂和鞘磷脂的形成存在于大脑白脂中，是脑甙中髓质的标志物。化学合成神经酸路线、工艺复杂、得率低、无法实现工业化。从鲨鱼油及脑中提取，受到资源制约，亦无法批量生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种神经酸原料来源广泛、提取成本低的提取神经酸的工艺方法。为达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

元宝枫油提取神经酸的方法，包括以下步骤：

(1)将元宝枫毛油过滤，除去杂质；然后将元宝枫油通过水洗；再进行脱酸处理，然后80℃水浴加热回流持续4小时，用饱和氯化钠水溶液清洗并回流2小时，直到元宝枫油澄清为止，常温静置4小时后分液保留上层清液，上层清液再次用饱和氯化钠水溶液清洗至少洗2次；

所述的脱酸处理，根据元宝枫油的酸价加入元宝枫油重量0.5～1％的氢氧化钠溶液进行脱酸处理，氢氧化钠溶液的质量浓度为4～8％，反应条件为30～50℃，搅拌速度30～60r/min，时间为30～60min，反应完成后按照10℃/h速度升温到80℃。

(2)将元宝枫油和无水乙醇混合，并加入催化剂，按照质量份数比，元宝枫油：无水乙醇：催化剂为100份：40～60份：1.0～1.5份；混合均匀后进行酯交换反应，反应的条件为75～80℃，反应时间2～3h；反应完成后水洗直到中性得到纯净元宝枫油；

(3)纯净元宝枫油用石油醚萃取；萃取两次，合并萃取得到的石油醚层，用质量浓度为l5％的HCl水溶液调pH至2～3；然后加热回流持续2小时，并保持pH值；回流后静置分液，得到的石油醚层进行水洗2次，最后蒸发除去石油醚；所述的蒸发除去石油醚，条件为40℃，真空度为0.05Mpa。得到的油层水洗至中性，用无水硫酸钠干操，得混和脂肪酸；

(4)步骤(3)得到的混和脂肪酸与尿素、体积浓度95％乙醇混合，得到脲包混合液，所述的脲包混合液为尿素：混合脂肪酸：95％乙醇按照w/w/v的比例3：2：14混合，脲包混合液在20℃冷却30min，并采用300MPa压力保压20min。脲包混合液加热70℃回流至澄清，然后5℃条件冷藏8h，再将-l0℃冷冻l2h，24h后取出，抽滤至干，低温干燥包埋晶体呈无色至淡黄色，再反复结晶l次，得到神经酸粗品；

(5)在30℃下用去离子水洗抽滤神经酸粗品，洗除至无尿素残留，用石油酸-乙酸萃取，分液并旋缩，然后用300～400目硅胶柱层析分离，分离后依次用石油醚、l：l的石油醚：正乙烷、l：l的正乙烷：乙酸进行梯度洗脱；用Ag-TLc薄层检验，含神经酸部分反复冷冻结晶纯化即得神经酸纯品。所述的反复冷冻结晶纯化，采用低温分步冷冻结晶方法，在不同低温梯度，不同碳链长度的不饱和脂肪酸分步析出，低温梯度依次为5℃～10℃、10℃～20℃、10℃～40℃。