[发明专利]一种提高乳酸菌抗酸胁迫能力的方法有效
| 申请号： | 201910023689.2 | 申请日： | 2019-01-10 |
| 公开（公告）号： | CN109628366B | 公开（公告）日： | 2020-12-29 |
| 发明（设计）人： | 张娟;杨谨华;刘为佳;朱政明;陈坚;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/74;C12N15/31;C12R1/01 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 乳酸菌 胁迫 能力 方法 | ||
1.二肽转运底物结合蛋白DppA在提高乳酸乳球菌抗酸胁迫能力中的应用，其特征在于，在乳酸乳球菌中过量表达二肽转运底物结合蛋白DppA；所述二肽转运底物结合蛋白DppA是微生物细胞膜上用于转运二肽的蛋白，编码所述二肽转运底物结合蛋白DppA的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述过量表达为先将编码二肽转运底物结合蛋白DppA的基因与表达载体连接以构建含有编码二肽转运底物结合蛋白DppA的基因的重组质粒，再将重组质粒导入乳酸乳球菌中。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述表达载体为pNZ8148载体、pNZ8149载体、pNZ8151载体或pNZ8152载体。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述表达载体为pNZ8148载体时，构建含有编码二肽转运底物结合蛋白DppA的基因的重组质粒的方法为先以Lactococcus lactisNZ9000的基因组为模板，设计引物并通过PCR扩增获得核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因片段，然后将核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因片段与pNZ8148载体通过限制性内切酶进行双酶切得到酶切产物，最后将得到的酶切产物进行连接，得到含有编码二肽转运底物结合蛋白DppA的基因的重组质粒。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5和SEQID NO.6所示。
6.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述限制性内切酶为Nco I以及Xba I。
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