[发明专利]一种用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒在审
申请号: | 201910027831.0 | 申请日: | 2019-01-11 |
公开(公告)号: | CN109633177A | 公开(公告)日: | 2019-04-16 |
发明(设计)人: | 陈璋辉;夏娟;唐靖;赖天文 | 申请(专利权)人: | 广东医科大学附属医院 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/96 |
代理公司: | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 | 代理人: | 郭伟红 |
地址: | 524001 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 实验器皿 血液病 抗体 基因捕获 试剂盒 器皿 捕获 相关基因 标签卡 外罩 蛋白 基因捕获技术 紫外线灯 灵敏度 检测仪 实验组 右上角 主标签 包被 卡接 配对 盛装 检测 | ||
1.一种用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒,其特征在于,所述用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒设置有外壳,外壳右侧设置有对照器皿;对照器皿下方设置有主标签卡;主标签卡左侧设置有实验器皿;实验器皿上方或者下方都设置有对应的各实验组标签卡;外壳卡接设有外罩;外罩的四周嵌装有紫外线灯;外壳的右上角嵌装有检测仪,与实验器皿和对照器皿底部的感应贴电相连;
实验器皿内盛装有包被相关血液病蛋白的抗体;
所述相关血液病蛋白的抗体为配对的抗体,每一对抗体分别对应一个检测指标;
对照器皿内盛装有样品液、内装标记有对应抗体的免疫荧光颗粒;利用荧光颗粒的高灵敏度特征,结合和相应抗体的特异性标记,配以优化的样品液,使检测样品平滑流过透膜的表面;透膜设置在对照器皿上面;透膜为亲水性多孔层状材料,各抗体在透膜上的包被位置互不交叉。
2.如权利要求1所述的用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒,其特征在于,外壳的底部粘贴有防滑垫。
3.如权利要求1所述的用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒,其特征在于,所述的检测仪右上角安装有蜂鸣器。
4.如权利要求1所述的用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒,其特征在于,检测仪内部安装有定时器和计时器。
5.如权利要求1所述的用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒,其特征在于,实验器皿内还盛装有相关血液病蛋白检测质控品。
6.如权利要求1所述的用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒,其特征在于,对照器皿内盛装有相关血液病蛋白检测物,相关血液病蛋白检测物为经荧光颗粒标记的相关血液病蛋白检测抗体。
7.如权利要求1所述的用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒,其特征在于,免疫荧光颗粒直径为300nm和390nm;
外壳内还盛装有试剂卡;
试剂卡中试剂样品液包含表面活性剂、阻断剂、防腐剂;所述防腐剂选自叠氮钠、硫柳汞和PrOClin300中的一种或多种,防腐剂的质量体积比为0.1-2%。
8.如权利要求1所述的用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒,其特征在于,样品液包括:缓冲液、磷酸盐缓冲液和甘氨酸缓冲液中的一种或多种;样品液的浓度为10mM~100mM,pH为6~10。
9.如权利要求8所述的用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒,其特征在于,各缓冲液包括硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液和甘氨酸缓冲液中的一种或多种,缓冲液的浓度为10mM,pH为7.2。
10.一种如权利要求1所述用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒的检测方法,其特征在于,所述用于捕获血液病相关基因的基因捕获试剂盒的检测方法包括以下步骤:
胶乳颗粒的活化、洗涤,将乳胶表面修饰的基团活化,取商品化的直径为390nm乳胶胶乳溶液离心,弃上清,沉淀用洗涤缓冲液重复洗涤3次;将末次沉淀重悬于所述洗涤缓冲液中,使胶乳颗粒的质量体积比终浓度为1%,所述洗涤缓冲液选自PBS缓冲液和MES缓冲液中的一种:
抗体包被胶乳颗粒,取1ml活化洗涤后的390nm胶乳溶液,加相关血液病蛋白抗体,使相关血液病蛋白的抗体,终浓度为1mg/ml;混匀后,置37℃摇床以220rpm转速包被18h;用PBS缓冲液洗涤未与胶乳粒子结合的相关血液病蛋白的抗体,重复3次;封闭:将洗涤后的包被相关血液病蛋白的抗体的胶乳颗粒溶于包含所述保护剂的缓冲液中,使所述胶乳颗粒的质量体积比终浓度为0.1-0.14%;
相关血液病蛋白的抗体和乳胶颗粒结合后的封闭,将所述乳胶颗粒与所述相关血液病蛋白的抗体混合物,加入脱脂奶粉0.3%,室温下反应2h,离心,除去其中少量的沉淀物;
清洗,将形成的乳胶颗粒-相关血液病蛋白的抗体复合物溶液离心,弃上清,加入磷酸盐缓冲液重复清洗3次;将末次沉淀溶于含所述保护剂和防腐剂的缓冲液中,使所述胶乳颗粒的质量体积比终浓度为0.04%-0.14%;
抗体包被透膜,将相关抗体分别以1mg/ml的浓度划到透膜上包被并干燥而得,干燥条件为37℃干燥4小时。
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