[发明专利]一种检测样液中加替沙星含量的方法

权利要求书

1.一种检测样液中加替沙星含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一、加替沙星标准液的配制：将加替沙星标准品用碱性溶液溶解，并使用二次蒸馏水定容得到加替沙星标准液，冷藏备用；

步骤二、原料准备：选取3.0％～5.0％(m/v)的Triton X-114溶液、1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液和20％～50％(m/v)的氯化钠溶液冷藏备用；

步骤三、样液处理：去除样液中的悬浮颗粒，然后将样液在避光条件下冷藏备用；

步骤四、制定加替沙星标准溶液的浊点萃取标准曲线:移取0.05～5ml的加替沙星标准溶液于15mL离心管中，依次加入1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液0.5～5.0mL，3.0％～5.0％(m/v)的Triton X-114溶液0.1～1.0mL，20％～50％(m/v)的氯化钠溶液1.0～4.0mL得到混合液，混匀；待混合液中出现浑浊时，将混合液的pH值调节为1～6，用二次蒸馏水定容，摇匀，于室温下静置5.0～30.0min；然后以2000～8000rpm的转速离心5～10min，冷却使其自然分层，得到上层的水相和下层的富集相；冷却后反转离心管弃去上层水相，再用无水乙醇稀释下层富集相并定容至0.5～5mL，联用荧光分光光度计对其进行测定，确定加替沙星的激发波长和发射波长分别为295nm和480nm，得到加替沙星标准液的浊点萃取标准曲线；

步骤五、加替沙星样液中加替沙星的测定：移取0.05～5ml的加替沙星样液于15mL离心管中，依次加入1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液0.5～5.0mL，3.0％～5.0％(m/v)的TritonX-114溶液0.1～1.0mL，20％～50％(m/v)的氯化钠溶液1.0～4.0mL得到混合液，混匀；待混合液中出现浑浊时，将混合液的pH值调节为1～6，用二次蒸馏水定容，摇匀，于室温下静置5.0～30.0min；然后以2000～8000rpm的转速离心5～10min，冷却使其自然分层，得到上层的水相和下层的富集相；冷却后反转离心管弃去上层水相，再用无水乙醇稀释下层富集相并定容至0.5～5mL，联用荧光分光光度计对其进行测定，确定加替沙星的激发波长和发射波长分别为295nm和480nm，得到加替沙星样液的荧光强度，结合加替沙星标准液的浊点萃取标准曲线，得到加替沙星样液中加替沙星的含量。

2.根据权利要求1所述的一种检测样液中加替沙星含量的方法，其特征在于：步骤一中，所述碱性溶液为0.1～1.0mol/L的氢氧化钠溶液。

3.根据权利要求1或2所述的一种检测样液中加替沙星含量的方法，其特征在于：步骤四和步骤五中，混合液冷却使其自然分层，得到上层的水相和下层的富集相时，采用冰浴冷却5～10min。

4.根据权利要求3所述的一种检测样液中加替沙星含量的方法，其特征在于：步骤四和步骤五中，混合液的pH值调节时采用0.1～1.0mol/L的盐酸溶液。

5.根据权利要求4所述的一种检测样液中加替沙星含量的方法，其特征在于：步骤二中所述Triton X-114溶液的配制：取Triton X-114用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为3.0％～5.0％(m/v)的Triton X-114溶液。

6.根据权利要求4所述的一种检测样液中加替沙星含量的方法，其特征在于：步骤二中所述SDS溶液的制备：取SDS用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液。

7.根据权利要求4所述的一种检测样液中加替沙星含量的方法，其特征在于：步骤二中所述氯化钠溶液的制备：取氯化钠用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为20％～50％(m/v)的氯化钠溶液。