[发明专利]一种用萝卜苷生产高纯度莱菔素的方法

说明书

本发明属于生产莱菔素的技术领域，特别涉及一种用萝卜苷生产高纯度莱菔素的方法。本发明方法以萝卜苷、黑芥子酶、透析膜管为原料，经萝卜苷反应液配制、反应体系制备、透析反应、反渗透浓缩、离心萃取等步骤生产得到莱菔素。本发明方法引入透析膜管进行透析反应，实现了产物与底物、酶的原位分离，显著提高了萝卜苷降解率，实现了黑芥子酶的完全截留，可重复用于莱菔素的生产。本发明方法具有生产工艺简单、稳定、易于组织放大，产品收率高，设备投资成本低，生产成本低，资源综合利用率高，环境友好等特点。采用本发明方法制备出的莱菔素具有纯度高、无溶剂残留、性能稳定等特点，可广泛应用于医药、食品和日化等行业。

技术领域

本发明属于生产莱菔素的技术领域，特别涉及一种用萝卜苷生产高纯度莱菔素的方法。

背景技术

4-甲基亚磺酰基-3-丁烯基硫苷，俗称萝卜苷（Glucoraphenin，C₁₂H₂₁NO₁₀S₃，435.5Da），是萝卜籽中含量最多的一种硫苷。黑芥子酶（Myrosinase，EC 3.2.3.1）又称β-硫代葡萄糖苷酶，主要分布于十字花科植物的根、茎、叶、幼苗及种子中。硫苷在黑芥子酶的催化作用下，S-糖苷键断裂，形成D-葡萄糖、氢离子和不稳定的中间体糖苷配基，糖苷配基失去硫酸根离子后通过Hoffmann或Lossen重排，生成具有生物活性的异硫氰酸酯或盐。萝卜苷经黑芥子酶催化可生成4-异硫氰酸基-1-(甲基亚磺酰基)-1-丁烯，俗称莱菔素（Sulforaphene，C₆H₉NOS₂，175.3Da），其具有很强的抗氧化、抗细胞突变、抗癌等生物活性，应用前景十分广阔。

现有生产莱菔素的方法，如2017年10月17日授权公告的公告号为CN 105198782 B“萝卜种子中莱菔素的提取和分离纯化方法”的发明专利，该专利公开的方法是：以萝卜种子为原料，经冷冻干燥、粉碎、萝卜种子脱脂、酶解、萃取、浓缩等步骤得到莱菔素粗提物，然后经制板、薄层层析等步骤进一步纯化得到莱菔素。该方法存在的主要缺点有：①以萝卜种子为原料进行组织生产，工艺路线长、过程复杂，不便于规模化生产；②萝卜种子脱脂环节，虽有助于提高后续的酶解效率，但是需要采用大量的乙醚，成本较高，同时造成了部分萝卜苷的损失，降低了莱菔素产率；③工艺中采用较大的相比进行莱菔素萃取，导致后续浓缩时间长，莱菔素易发生降解，同时浓缩能耗较高；④采用薄层层析进行莱菔素的分离纯化，生产能力有限，不适合工业化生产，而且有机试剂消耗较多，污染严重。

发明内容

本发明的目的是针对现有生产莱菔素方法的不足之处，提供一种用萝卜苷生产高纯度莱菔素的方法，该方法具有生产工艺简单、稳定、易于组织放大，产品收率高，设备投资成本低，生产成本低，资源综合利用率高，环境友好等特点。采用本发明方法制备出的莱菔素具有纯度高、无溶剂残留、性能稳定等特点。