[发明专利]一株线纹海马致病菌株及肠炎病灭活疫苗有效
| 申请号： | 201910029774.X | 申请日： | 2019-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN110819549B | 公开（公告）日： | 2022-03-11 |
| 发明（设计）人： | 郑风荣;刘洪展;王波;李营;赵超;王宗兴 | 申请（专利权）人： | 自然资源部第一海洋研究所;青岛清源海洋生物科技公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/36;A61K39/106;A61P31/04;C12R1/63 |
| 代理公司： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 李冉 |
| 地址： | 266061 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一株线纹 海马 致病 菌株 肠炎 病灭活 疫苗 | ||
1.一株海马致病菌株，为副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)，保藏编号为CGMCCNo.15441。
2.一种海马灭活疫苗，其特征在于疫苗中包含有权利要求1所述的副溶血弧菌CGMCCNo.15441的灭活菌体。
3.如权利要求2中权利要求所述的灭活疫苗，其特征在于，上述的疫苗中灭活菌体的浓度为107-1010CFU/ml。
4.如权利要求3所述的灭活疫苗，其特征在于，上述的疫苗中灭活菌体的浓度为109CFU/ml。
5.如权利要求3所述的灭活疫苗，其特征在于，所述灭活疫苗的制备方法如下：
首先，将分离纯化的副溶血弧菌接种于含有3％NaCl的LB液体培养基中，28℃震荡培养16-24小时，待菌液浓度达109CFU/ml或分光光度计检测OD600达到0.6以上时终止培养，获得菌株的扩大培养液；
然后按体积比5‰加入甲醛溶液，于室温灭活12-16小时，期间震荡5-10次；得到菌株的灭活菌液；
然后，将菌株的灭活菌液于8000g、4℃离心15分钟，弃上清液，将沉淀用无菌生理盐水洗涤2次，收集菌体，用无菌生理盐水重悬菌液，浓度为109CFU/mL，4℃保存备用；
最后取灭活疫苗0.1ml涂布于2216E固体培养基，28℃培养48h后无菌落长出，即为合格的灭活疫苗。
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