[发明专利]一种TaqMan-MGB探针技术检测影响降脂药物疗效基因的方法学建立

权利要求书

1.一种检测影响降脂药物疗效基因突变用的引物、TaqMan/MGB探针，其特征在于，引物探针的序列如下：

1)用于SLCO1B1基因T521C SNP位点检测的引物和TaqMan/MGB探针：

上游引物：5’-AAAGGAATCTGGGTCATAC-3’，

下游引物：5’-CCTATTCCACGAAGCATA-3’，

野生探针：5’-FAM-CCATGAACACATATA-MGB-3’，

突变探针：5’-HEX-CATGAACGCATATA-MGB-3’；

2)用于SLCO1B1基因A388G SNP位点检测的引物和TaqMan/MGB探针：

上游引物：5’-TTGATTAATTAAACAAGT-3’，

下游引物：5’-TCAGTGATGTTCTTACAG-3’，

野生探针：5’-FAM-ATGAATTGATATTAG-MGB-3’，

突变探针：5’-HEX-ATGAATCGATATTAG-MGB-3’；

3)用于SLCO1B1基因G910A SNP位点检测的引物和TaqMan/MGB探针：

上游引物：5’-CTCATATATGCATCCTC-3’，

下游引物：5’-TATATACACACAAACAT-3’，

野生探针：5’-FAM-TGTATACAGGTAAA-MGB-3’，

突变探针：5’-HEX-TGTATACAGGTAAA-MGB-3’；

4)用于ApoE基因T388C SNP位点检测的引物和TaqMan/MGB探针：

上游引物：5’-CTGTCCAAGGAGCTG-3’，

下游引物：5’-CCGCGCACGTCCT-3’，

野生探针：5’-FAM-CCGCACACGTCCT-MGB-3’，

突变探针：5’-HEX-CCGCGCACGTCCT-MGB-3’；

5)用于ApoE基因C526T SNP位点检测的引物和TaqMan/MGB探针：

上游引物：5’-CCTCGCCTCCCACC-3’，

下游引物：5’-CCCGGCCTGGTAC-3’，

野生探针：5’-FAM-TGCCAGGCGCTTC-MGB-3’，

突变探针：5’-HEX-TGCCAGGCACTTC-MGB-3’；

6)用于NPC1L1基因C18A SNP位点检测的引物和TaqMan/MGB探针：

上游引物：5’-TCACCAAGCGCAGGAG-3’，

下游引物：5’-CTGCCTTAATGTGTGTTCA-3’，

野生探针：5’-FAM-CGCTGAGCCCTTC-MGB-3’，

突变探针：5’-HEX-CGCTGATCCCTTC-MGB-3’。

2.根据权利要求1所述引物探针，其特征在于5’端标记有报告基团(Reporter，R)，如FAM、HEX、VIC或者ROX等，3’端标记的淬灭基团采用非荧光淬灭基团(NFQ)，本身不产生荧光，可以大大降低本底信号的强度，同时探针上还连接有MGB修饰集团，引物Tm值比探针Tm值低10℃左右，探针序列两端的标记为5’FAM-3’MGB、5’HEX-3’MGB、5’ROX-3’BHQ2。