[发明专利]一种用于血清或血浆中胰脂肪酶测定的试剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种用于血清或血浆中胰脂肪酶测定的试剂，其特征在于，所述试剂包括十二烷基硫酸钠、鱼精蛋白硫酸盐和鞘磷脂。

2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述十二烷基硫酸钠和鞘磷脂的质量比为10：1～30：1。

3.根据权利要求1或2所述的试剂，其特征在于，所述试剂中，所述十二烷基硫酸钠的质量体积百分含量为0.05％～0.5％；所述鞘磷脂的质量体积百分含量为0.005％～0.1％；所述鱼精蛋白硫酸盐的质量体积百分含量为0.001％～0.05％；

所述十二烷基硫酸钠和鞘磷脂的质量比为10：1～20：1。

4.根据权利要求1～3任一项所述的试剂，其特征在于，所述试剂包括试剂1和试剂2；

所述试剂1包括缓冲液、共脂肪酶、胆酸盐、十二烷基硫酸钠、鞘磷脂和鱼精蛋白硫酸盐；

所述试剂2包括缓冲液和底物；

优选地，所述底物为1,2-o-二月桂基-外消旋-甘油-3-戊二酸-(6-甲基试卤灵)酯；所述试剂2还包括表面活性剂。

5.根据权利要求4所述的试剂，其特征在于，所述胆酸盐选自脱氧胆酸盐、牛磺脱氧胆酸盐、鹅脱氧胆酸盐中的一种或多种；

优选地，所述胆酸盐为脱氧胆酸盐和/或牛磺脱氧胆酸盐。

6.根据权利要求4或5所述的试剂，其特征在于，所述试剂1的pH为7.5～8.5；

和/或，

所述试剂2的pH为3.5～4.5。

7.根据权利要求4～6任一项所述的试剂，其特征在于，所述缓冲液选自Tris缓冲液、GOOD’S缓冲、酒石酸缓冲液、柠檬酸缓冲液中的一种或多种；

和/或，

所述表面活性剂选自Brij 35、Thesit、Tween 20、Triton X-100、Triton X-405中的一种或多种。

8.根据权利要求1～7任一项所述的试剂，其特征在于，其包括如下组分：

试剂1：

试剂2：

优选地，所述试剂包括如下组分：

试剂1：

试剂2：

所述十二烷基硫酸钠和鞘磷脂的质量比为10：1～15：1；

所述鞘磷脂与所述鱼精蛋白硫酸盐的质量比为10：1～15：1。

9.权利要求1～8任一项所述试剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)试剂1的制备：将缓冲液、共脂肪酶、氯化钙、脱氧胆酸钠、牛磺脱氧胆酸钠、鱼精蛋白硫酸盐、鞘磷脂和十二烷基硫酸钠加入水中，搅拌至完全溶解，调节pH至7.50～8.50；

(2)试剂2的制备：将缓冲液和牛磺脱氧胆酸钠加入水中，搅拌至完全溶解，调节pH至3.50～4.50，得到基础液；将底物和表面活性剂混合均匀，得到底物溶液；将所述底物溶液滴入所述基础液，得到试剂2。

10.权利要求1～8任一项所述试剂在胰脂肪酶测定中的应用，其特征在于，将待测样品与试剂1以1：150～1：50的体积比混合，37℃孵育1～5min，加入与试剂1的体积比为1：5～1：2的试剂2，37℃孵育1～5min后检测反应液的吸光度；所述检测的主波长为570nm，副波长为800nm。