[发明专利]一种抗肿瘤微颗粒的制备方法、药剂及应用

说明书

本发明提供一种抗肿瘤微颗粒的制备方法，包括以下步骤：1)获得离体肿瘤细胞进行原代肿瘤细胞培养，并获得原代肿瘤细胞；2)将所述步骤1)得到的原代肿瘤细胞及培养液进行放疗照射，收集放疗后的上清液，获得所需微颗粒和凋亡的肿瘤细胞碎片混合物；3)将所述步骤2)得到的混合物进行离心，即得到所述抗肿瘤微颗粒。本发明还提供一种抗肿瘤微颗粒药剂，由抗肿瘤微颗粒通过纯化和浓缩而获得。本发明提供的抗肿瘤微颗粒的制备方法制得的抗肿瘤微颗粒可用于制备抗肿瘤药物。本发明可解决常规局部化疗效果差、副作用大、易产生耐药性的技术问题。

技术领域

本发明涉及抗肿瘤领域，更特别地，涉及一种抗肿瘤微颗粒的制备方法、药剂及应用。

背景技术

放射治疗是临床常规治疗肿瘤的有效治疗手段，肿瘤放射治疗是利用放射线产生的电离辐射来治疗肿瘤的一种局部治疗方法。大约70％以上的肿瘤患者在治疗的过程中需要用放射治疗，约有40％的癌症可以用放疗根治。放射治疗在肿瘤治疗中的作用和地位日益突出，已成为治疗恶性肿瘤的主要手段之一，尤其在头颈肿瘤、乳腺癌、肺癌和宫颈癌等一些肿瘤治疗中发挥着重要作用。但临床上有些肿瘤并不常规接受放射治疗，如胃癌、结肠癌、膀胱癌、肾癌，以及恶性胸腔积液(Malignant pleural effusion,MPE)等。虽然采用粒子植入等肿瘤内照射方式可以扩大放疗的适应症，但对外科手术技能要求较高，且存在手术风险。另外，此种方式也无法针对MPE进行治疗。

恶性胸腔积液(Malignant pleural effusion,MPE)是指胸膜原发或继发的恶性肿瘤所致的胸膜腔积液，其中肺癌胸膜转移造成的MPE约占30％以上。据统计，美国MPE发病人数超过150000人/年，国内发病人数超过900000人/年。由于MPE的病因及机制尚未完全明确，病死率极高。目前临床上针对MPE的治疗手段主要包括胸腔穿刺或内置式持续引流术、胸膜固定术及局部灌注化疗等。多数患者胸腔穿刺或置管引流后不足1个月即出现胸水再生长，需要反复多次胸腔穿刺抽液，患者耐受性差；胸膜固定术疗效尚可，但患者舒适度差，且有肺萎陷和毒血症风险。相较于以上几种方案，局部化疗是目前控制胸水最易实施的方案，并且可根据肿瘤体外药敏检测结果开展个体化化疗，可有效提高治疗效率。但目前常规局部化疗容易产生耐药，其整体胸水控制效果仍不满意、副作用大。因此，针对晚期癌症MPE患者，探索更加有效和安全的局部治疗手段仍是我们的重要努力方向。

发明内容

为解决以上问题，本发明提供了一种抗肿瘤微颗粒的制备方法、药剂及应用，该抗肿瘤微颗通过间接放疗实现抗肿瘤，解决常规局部化疗效果差、副作用大、易产生耐药性的技术问题。

本发明是由以下技术手段实现的：

一种抗肿瘤微颗粒的制备方法，包括以下步骤：

1)获得离体肿瘤细胞进行原代肿瘤细胞培养，并获得原代肿瘤细胞；

2)将所述步骤1)得到的原代肿瘤细胞及培养液进行放疗照射，收集放疗后的上清液，获得所需微颗粒和凋亡的肿瘤细胞碎片混合物；

3)将所述步骤2)得到的混合物进行离心，即得到所述抗肿瘤微颗粒。

步骤3)中所述离心包括依次进行第一离心、第二离心、第三离心，所述第一离心的转速为1000g，时间为10分钟，得上清；所述第二离心的转速为14000g，时间为2分钟，得上清；所述第三离心的转速为14000g，时间为60分钟，得沉淀即为微颗粒。

所述步骤2)的放疗剂量为5-20Gray，所述上清液收集时间为放疗后的第2-7天。

所述离体肿瘤细胞为自体来源的肿瘤细胞或肿瘤细胞系产生的肿瘤细胞。

所述离体肿瘤细胞来自于恶性胸腔积液或实体瘤。