[发明专利]一种除臭复合生物酶的制备方法

权利要求书

1.一种除臭复合生物酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）培养基准备：将玉米粉、豆饼粉、麸皮、糠、磷酸氢二钠和磷酸二氢钾以3-5%：2-4%：2.5-4%：0.5-2%：0.2-0.5%：0.01-0.05%的比例调制成ph7.0的溶液，作为酵母中性蛋白酶发酵培养基一，将酵母菌接种于培养基一在35度下培养，得到酵母菌液，即液体一；

将葡萄糖、酵母膏和琼脂以8-11%：0.5-2%：0.5-2.5%的比例配置，再加入蒸馏水调制成ph6.8的溶液，作为醋酸菌培养基二，将醋酸菌接种于培养基二在31度条件下培养，得到醋酸菌液，即液体二；

将葡萄糖8-11g，酵母膏6-9g，蛋白胨6-9g，西红柿汁90-110ml ，Tween-80 0.2-1ml和蒸馏水调制成900ml 的ph7.0的溶液，作为乳酸菌培养基三，将乳酸菌接种于培养基三在35度条件下培养，得到乳酸菌液体，即液体三；

（2）原料处理：将尾菜和果皮等进行清理去掉腐败变质部分，将清理后的尾菜和果皮等进行清洗；

（3）配料：将清洗后的尾菜和果皮等进行打浆，得到原料一，以红糖7%作为碳源，即原料二，尿素0.2%作为氮源，即原料三，将71%的经过过滤的自来水和22%的原料一，原料二，原料三混合制备成基础原材料；

（4）灭菌：将发酵罐放进用乙酸ph调至3.0的溶液中浸泡8小时，进行消毒；

（5）发酵：将过滤过的自来水加入发酵罐放置12小时，每4小时搅拌20分钟，将基础原材料加入到发酵罐同时开始升温，在发酵罐升温至35度时将液体一以0.2%容量加入发酵罐继续发酵，此处为第一阶段发酵，酵母菌发酵阶段将大分子分解成小分子，把淀粉分解成二氧化碳和酒精，也叫糖化；

发酵10小时后将液体二以0.2%容量加入发酵罐继续发酵，此处为第二阶段发酵，醋酸发酵阶段将酒精分解掉，也叫醋化；

发酵18小时后将液体三以0.2%容量加入发酵罐中继续发酵，此处为乳酸菌发酵阶段，乳酸在反应作用下产生益生菌，也叫熟化；

继续发酵120小时，此处为代谢阶段，益生菌产生代谢物，主要为各种蛋白质，氨基酸等复合成分；

再继续发酵120小时后检测发酵液ph值，pH值降到3.5以下，无其他异味则发酵结束；

（6）提取成品：将发酵产生的液体和固体分离出来，将液体放入离心机中，分离出悬浮物和其他残渣，将离心机中分离的液体通过分子量为15000的透析膜再次过滤，得到澄清的液体成品。

2.根据权利要求1所述的除臭复合生物酶的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述的培养基一的组分为：玉米粉4%，豆饼粉3%，麸皮3.2%，糠1%，磷酸氢二钠0.4%和磷酸二氢钾0.03%，培养基二的组分为：葡萄糖10%，酵母膏1%，琼脂1.5%和蒸馏水，培养基三的组分为：葡萄糖10g，酵母膏7.5g，蛋白胨7.5g，西红柿汁100ml ，Tween-80 0.5ml和蒸馏水。