[发明专利]提高坛紫菜多糖生物活性的方法

说明书

本发明提出了一种提高坛紫菜多糖生物活性的方法，将坛紫菜粗多糖溶解于pH为3.5～6.0的缓冲液中，加入水解酶，使多糖终浓度为2～10mg/mL，水解酶终浓度为20～60U/mL，之后进行酶解反应，获得降解液；将降解液进行水浴处理使酶失活，离心，得上清液Ⅰ；将上清液Ⅰ进行透析，将所得透析液旋蒸浓缩至原体积的20～30％，冷冻干燥，得到坛紫菜降解多糖。本发明得到的坛紫菜降解多糖与坛紫菜粗多糖相比，体外抗氧化活性、胆酸结合活性和免疫活性均显著提高。本发明还提出一种如上述方法制备所得到的降解坛紫菜多糖作为功能性食品基料的应用。

技术领域

本发明属于化学化工技术领域，涉及一种通过酶解坛紫菜粗多糖使其生物活性得到增强的方法。

背景技术

坛紫菜属红藻纲，红毛菜科，俗称紫菜、乌菜，主要在我国福建、浙江等南部沿海地区多有种植，富含蛋白质、多糖和维生素，是一种食用与药用价值很高的海藻植物，所以很受人们的欢迎。紫菜味美价廉，资源丰富，综合这些特性，紫菜成为了一个研究热点，因此将坛紫菜开发成功能食品有很好的前景。坛紫菜多糖是一种半乳聚糖硫酸酯，占紫菜干重的30％左右，不同种类、不同季节和不同生长地区提取出的紫菜多糖的化学组分不同。坛紫菜粗多糖的分子量较大，生物活性较低。

对多糖进行化学修饰和将其水解为分子量较小的组分都可使多糖的生物活性得到提高，但化学修饰可能会带来安全性问题。水解的方法虽然较多，其中酶法降解的优点是作用条件温和，且可避免硫酸基的脱落，缺点是不易得到水解效率高的酶。目前对坛紫菜多糖的酶法降解尚未见报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提出一种提高坛紫菜多糖生物活性的方法；

为解决上述技术问题，本发明提出一种提高坛紫菜多糖生物活性的方法，包括以下步骤：

将坛紫菜粗多糖(CPH)溶解于pH为3.5～6.0的缓冲液中，加入水解酶，使多糖终浓度为2～10mg/mL，水解酶终浓度为20～60U/mL，之后进行酶解反应，获得降解液；

所述酶解反应的条件为：pH 3.5～6.0，反应温度为30～70℃，反应时间为0.5～4h。

将降解液进行水浴处理(90±5℃，15±2min)使酶失活，离心，得上清液Ⅰ。

将上清液Ⅰ进行透析(截留分子量为3500Da的透析袋透析72h)，将所得透析液(留在透析袋内的液体)旋蒸(60～65℃)浓缩至原体积的20～30％，冷冻干燥(-50～-60℃，24±1h)，得到坛紫菜降解多糖(DCPH)。

作为本发明提高坛紫菜多糖生物活性的方法的改进：

所述多糖终浓度为4mg/mL，水解酶终浓度为50U/mL；

所述酶解反应的条件为：pH 5.0，反应温度为47.5℃，反应时间为2h。

作为本发明提高坛紫菜多糖生物活性的方法的进一步改进：

所述水解酶为果胶酶；

所述缓冲液为乙酸-乙酸钠缓冲液。

作为本发明提高坛紫菜多糖生物活性的方法的进一步改进：

将所得坛紫菜降解多糖(DCPH)进行分离纯化，包括以下步骤：

①、粗分：