[发明专利]一种黄精品种复壮的组培快繁方法

权利要求书

1.一种恩施黄精品种复壮的组培快繁方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)无菌苗的获得：取恩施黄精地下块茎，洗净后放于超净台上，用解剖刀将带芽眼的块茎切成方形小块；用酒精震荡冲洗黄精小块茎28-32s后转入0.1％的升汞溶液中消毒7～9min，然后用无菌水冲洗5～6次，再用吸水纸将消毒后黄精块茎中的水吸干，之后接种到组成为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L的培养基上，培养29-31天后从芽眼长出无菌苗；

(2)茎尖的培养：在解剖镜下切下步骤(1)所获得无菌苗的茎尖，接种到组成为1/2MS+6-BA0.5mg/L+0.7mg/LNAA的培养基上，培养24-26天后长出不定芽；

(3)不定芽的增值：将步骤(2)获得的不定芽转接入增殖培养基MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L进行增殖培养，培养30-40天后获得长度为到3～5cm的增殖丛生芽；

(4)壮苗培养：将步骤(3)获得的增殖丛生芽切分成单株苗转接到MS基本培养基中培养约30～40天；

(5)生根培养：将经过步骤(4)壮苗培养后的单株苗接种到生根培养基中进行生根培养20～30天，幼苗基部长出3～8条根，继续培养至50-60天，获得生根数多、根长、根壮的生根组培苗；

(6)移栽：将步骤(5)获得的生根组培苗移栽到基质中，在温室中培育1个月后，再移到室外培育1个月便移栽至大田成苗。

2.根据权利要求1所述的恩施黄精品种复壮的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤(1)-(6)中各组培阶段的培养条件是：光照强度为40μmol.m^-2.s^-1，光照时间12h/d，其中培养基pH5.8-6.0，培养温度为20～21℃；蔗糖为25g/L，琼脂为6.2g/L。

3.根据权利要求1所述的恩施黄精品种复壮的组培快繁方法，其特征在于，步骤(1)中所述洗净的过程为：首先将恩施黄精地下块茎上的泥土洗净，然后用洗洁精溶液浸泡8-12min，再用毛刷刷净并用自来水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2-4次。

4.根据权利要求1所述的恩施黄精品种复壮的组培快繁方法，其特征在于，步骤(1)中所述方形小块块茎的长度约0.5cm，所述酒精溶液的体积浓度为75％。

5.根据权利要求1所述的恩施黄精品种复壮的组培快繁方法，其特征在于，步骤(2)中切下的茎尖长度为0.4-0.6mm。

6.根据权利要求1所述的恩施黄精品种复壮的组培快繁方法，其特征在于，步骤(5)中所述的生根培养基为：1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.4mg/LNAA。

7.根据权利要求1所述的恩施黄精品种复壮的组培快繁方法，其特征在于，步骤(6)中移栽前要对组培苗进行驯化，具体为：在组培室中将培养瓶盖第一天不全打开，第二天再全部打开，瓶中每天喷洒蒸馏水，驯化一周后再进行移栽。

8.根据权利要求1所述的恩施黄精品种复壮的组培快繁方法，其特征在于，步骤(6)中所述基质由草炭:蛭石按体积比1:3配制而成。