[发明专利]泮托拉唑钠中基因毒性杂质的高灵敏度分析方法

说明书

本发明公开了一种泮托拉唑钠中基因毒性杂质2‑氯甲基‑3，4‑二甲氧基吡啶盐酸盐(CMDP)的高灵敏度分析方法。采用高效液相色谱‑质谱联用的分析方法，用碳酸氢铵溶液和乙腈的混合溶液来稀释样品，并以挥发性的碳酸盐溶液和乙腈为流动相，检测限和定量限分别为0.2ppm和0.6ppm，可以更高效地分离并检测出杂质CMDP，具有专属性强、灵敏度高，简单快捷、成本低的优点。

技术领域

本发明属于药物分析检测技术领域，具体涉及一种泮托拉唑钠中基因毒性杂质的分析方法，更具体地涉及一种用高效液相色谱-质谱联用法对2-氯甲基-3，4-二甲氧基吡啶盐酸盐(CMDP)进行分离和定量测定的方法。

背景技术

泮托拉唑钠是一种新型质子泵抑制剂，用于治疗胃溃疡、十二指肠溃疡、食道炎等，具有安全可靠，毒副作用小的特点。

化合物2-氯甲基-3，4-二甲氧基吡啶盐酸盐(CMDP)是泮托拉唑钠的重要中间体，为基因毒性杂质，必须严格控制其残留。但是，国内外药典均尚未收录该杂质的质量标准。根据欧洲药典管理局(EMEA)发布的《遗传毒性杂质限度指导原则》的规定，按照毒理学担忧阈值(TTC)作为评价大部分遗传毒性杂质的阈值，则遗传毒性杂质摄入量最大限值为1.5ug/天。按照泮托拉唑钠最大剂量240mg/天(40mg/片，3次/天，一次两片)计，该杂质的控制限度为6.25ppm。根据检测要求，检测限一般为控制限度的0.1左右，故检测限应在0.6ppm以下。常规的气相及液相检测方法均无法满足此检测限要求，如现有技术中公开的检测泮托拉唑钠原料或制剂中主成分泮托拉唑或其杂质A-F的方法。另外，泮托拉唑钠和CMDP易发生降解，影响检测结果的准确性，增加了检测的难度。

文献Chromatographia(2008)，68(5/6)，481-484公开了用GC-MS和RP-LC检测泮托拉唑钠中CMDP的方法。其中GC-MS方法的检测限为1ppm，RP-LC方法的检测限为3ppm，检测灵敏度差，无法满足检测要求。

文献Journal ofPharmaceutical and Biomedical Analysis(2012)，70，592-597公开了用LCMS/MS设备，用乙腈/水做稀释剂，恒定比例的乙腈/醋酸铵做洗脱液，检测CMDP的方法。该方法可满足检测要求，但是该方法设备昂贵，操作复杂，不适用于工业化生产。

因此，为严格控制CMDP的含量，开发一种灵敏度高、成本低，且易于操作的检测分析方法是亟需解决的难题。

发明内容

针对现有技术中存在的缺点与不足，本发明的目的是提供一种泮托拉唑钠中基因毒性杂质(CMDP)的高灵敏度分析方法。本申请发明人使用高效液相色谱-质谱联用设备，通过对流动相、洗脱方式、质谱等条件反复筛选，探索出了一种满足低检测限要求，且兼顾主成分与杂质分离的检测方法，实现了简便有效地分离和分析CMDP的目的。

本发明的目的，可通过以下技术方案实现：

本发明提供一种泮托拉唑钠中基因毒性杂质2-氯甲基-3，4-二甲氧基吡啶盐酸盐的高灵敏度分析方法，其特征在于：泮托拉唑钠样品经稀释剂稀释后，采用高效液相色谱-质谱联用法，用碳酸盐溶液和乙腈为流动相洗脱。

在一种优选方案中，所述的碳酸盐溶液为碳酸氢铵溶液或碳酸铵溶液。由于泮托拉唑在酸、强碱、加热等条件下均会被破坏，CMDP在酸性条件下会降解，为保证检测的准确度，需要严格控制稀释剂与流动相的酸碱度。本申请发明人对各种碱或盐溶液筛选过程中，发现通过添加碱性缓冲溶液的方式调节稀释剂与流动相的pH时，缓冲溶液配制过程中细微的差别就会对测定结果造成较大差异，故选用单一的碱或盐溶液来调节稀释剂与流动相的pH。经过大量筛选试验后，最终发现采用挥发性的碳酸盐溶液可准确方便地调整pH值至合适的弱碱性，同时能够保证测定过程中样品的稳定性，满足检测要求。

在一种优选方案中，所述碳酸盐溶液的浓度为0.01-0.03mol/L，优选0.02mol/L。