[发明专利]一种腈水合酶突变体、含该突变体的基因工程菌及其应用有效
| 申请号： | 201910039981.3 | 申请日： | 2019-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN109593750B | 公开（公告）日： | 2020-01-21 |
| 发明（设计）人： | 周哲敏;刘中美;周丽;崔文璟;郭军玲;蓝瑶 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/60;C12N1/21;C12N15/70;C12P17/12;C12P13/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 腈水合酶突变体 基因工程菌 突变体 烟酰胺 产物耐受性 高密度发酵 酶工程技术 温度耐受性 安全清洁 催化反应 催化效率 分离纯化 化学生产 天冬酰胺 重组菌株 甘氨酸 全细胞 新突变 终产物 产率 底物 酶法 烟腈 生产工艺 制备 应用 | ||
1.一种腈水合酶突变体，其特征在于，含有PtNHase-α亚基、PtNHase-β亚基以及一个调控蛋白PtNHase-p，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示。
2.编码权利要求1所述腈水合酶突变体的基因。
3.含有权利要求2所述基因的载体或细胞。
4.含权利要求1所述腈水合酶突变体的组合物。
5.一种重组大肠杆菌，其特征在于，表达权利要求1所述的腈水合酶突变体。
6.如权利要求5所述的重组大肠杆菌，其特征在于，以大肠杆菌BL21为宿主，以pET24a(+)为表达载体。
7.一种提高腈水合酶稳定性的方法，其特征在于，以α亚基、β亚基、调控蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.3所示的腈水合酶为亲本酶，将α亚基的第6位亮氨酸突变为苏氨酸、第19位丙氨酸突变为缬氨酸、第126位苯丙氨酸突变为酪氨酸，β亚基的第46位甲硫氨酸突变为赖氨酸、第47位甘氨酸突变为天冬氨酸、第108位谷氨酸突变为精氨酸、第212位丝氨酸突变为酪氨酸。
8.权利要求5或6所述重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于，是将如SEQ ID NO.8所示的编码腈水合酶的基因与表达载体连接，转入大肠杆菌中。
9.权利要求1所述的腈水合酶突变体或表达权利要求1所述的腈水合酶突变体的细胞在生产含烟酰胺或丙烯酰胺的产品中的应用。
10.权利要求1所述的腈水合酶突变体或表达权利要求1所述的腈水合酶突变体的细胞在饲料、食品或制药领域内的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江南大学，未经江南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910039981.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
