[发明专利]一种光交联型去细胞瓣膜及其制备方法和其应用

说明书

本发明涉及一种光交联型去细胞瓣膜及其制备方法和其应用。上述制备方法包括：步骤一、将去细胞处理后的瓣膜置于核黄素溶液中并轻柔摇晃以使核黄素充分扩散进入去细胞基质中；步骤二、将经步骤一处理的瓣膜从核黄素溶液中取出，再以紫外线照射交联后清洗去除瓣膜中残余核黄素，即可获得一种光交联型去细胞瓣膜。本发明中创新性的将核黄素及光交联用于处理并增强去细胞基质瓣膜的力学性能，且结果显示该处理能显著提高瓣膜的杨氏模量，并能减缓其体内降解速度。

技术领域

本发明涉及一种支架材料，尤其涉及一种光交联型去细胞瓣膜及其制备方法和其应用。

背景技术

去细胞基质是应用不同去细胞方法对组织进行去细胞处理所获得的，在去细胞过程中尽可能地保留天然组织原有形态及生物力学性能，去细胞基质组织作为仿生支架材料，常用于组织工程与再生医学中。

但是由于组织中的弹性蛋白、蛋白聚糖等细胞外基质仍存在不同程度的损伤、丢失，致使去细胞处理后组织存在力学性能下降、易降解等缺点。而力学性能下降使得去细胞处理后的瓣膜在植入人体后易发生穿孔、关闭不全；而降解过快可能使植入组织因降解速度远快于人体组织再生而导致植入物早期衰败。

由于去细胞基质的主要成分为胶原纤维，胶原纤维的结构及空间排列影响组织的力学性能，因此促进胶原交联可增强其力学性能及稳定性。促进胶原交联的方法有多种，在生理环境中主要是通过相应酶催化交联，如赖氨酰氧化酶，从而使胶原获得其自然的硬度、稳定性以及组织特异的弹性；非酶促法包括用化学试剂、光氧化等，传统的戊二醇交联途径虽然能显著提高去细胞基质的力学性能，但存在易钙化、易衰败且有细胞毒性等问题。导致细胞不能在戊二醛交联后的组织上生长，难以发生组织重塑。

因此，需要一种新的不仅能增强去细胞处理后组织的力学性能而且能减缓其体内降解速度的制备方法。

发明内容

针对上述问题，现提供一种旨在解决上述问题的光交联型去细胞瓣膜及其制备方法和其应用。

具体技术方案如下：

一种光交联型去细胞瓣膜的制备方法，具有这样的特征，包括如下步骤：

步骤一、将去细胞处理后的瓣膜置于核黄素溶液中并轻柔摇晃以使核黄素充分扩散进入去细胞基质中；

步骤二、将经步骤一处理的瓣膜从核黄素溶液中取出，再以紫外线照射交联后清洗去除瓣膜中残余核黄素，即可获得一种光交联型去细胞瓣膜。

上述的制备方法，还具有这样的特征，步骤一核黄素溶液中核黄素的质量浓度为0.04％-1％。

上述的制备方法，还具有这样的特征，步骤二中紫外线照射交联时间为5-120min，紫外光照射光强为1-5mw/cm²。

上述的制备方法，还具有这样的特征，步骤二中清洗方法为：将经紫外线照射交联后的瓣膜于摇床上用无菌PBS清洗24小时，每6小时换液1次。

上述的制备方法，还具有这样的特征，瓣膜选自猪主动脉瓣膜或牛心包。

本发明中去细胞处理的方法采用本发明人在先申请的申请号为CN201610921956.4、发明名称为“一种用于去除组织细胞的试剂盒和去细胞方法”的专利中提供的方法进行处理。

本发明的第二个方面是提供一种根据上述制备方法制备获得的光交联型去细胞瓣膜。

本发明的第三个方面是提供一种上述光交联型去细胞瓣膜在组织工程及再生医学中的应用。

本发明中提供的光交联型去细胞瓣膜可应用于生物支架的制备。

上述方案的有益效果是：