[发明专利]微藻批量保种培养装置及由该装置批量培养微藻的方法

权利要求书

1.微藻批量保种培养装置，其特征在于，包括由自上而下依次平行排列的照明装置(101)、散热装置(201)、控温装置(301)和控制电路(601)组成的方形结构，且所述照明装置(101)、散热装置(201)和控温装置(301)分别与所述控制电路(601)连接；其中，

所述照明装置(101)为方形中空结构，包括位于其上的控制面板和若干个LED灯串(102)，且所述LED灯串(102)平行有序排列于所述控制面板下方；

所述散热装置(201)为方形中空结构，包括若干个散热风扇(202)均匀分布于两侧；

所述控温装置(301)由铝制恒温凹形孔板(302)、半导体制冷组件(401)、铝制恒温平板(303)和加热片(501)自上而下依次平行排列而成。

2.根据权利要求1所述的微藻批量保种培养装置，其特征在于，所述半导体制冷组件(401)由若干半导体制冷片按照纵横向交替排布而成。

3.根据权利要求1所述的微藻批量保种培养装置，其特征在于，所述控制电路(601)为方形中空结构，内置有依次平行独立排布的电源、温度继电器、风扇控制器、照明控制器和时间继电器，通过线路分别与所述照明装置(101)、散热装置(201)和控温装置(301)连接。

4.根据权利要求1所述的微藻批量保种培养装置，其特征在于，还包括由含有液晶屏和触摸按钮的保温外壳组成的外箱体。

5.根据权利要求4所述的微藻批量保种培养装置，其特征在于，所述保温外壳的材质为双层保温塑料。

6.根据权利要求1所述的微藻批量保种培养装置，其特征在于，所述加热片(501)含有两根电源线，所述电源线与所述控制电路(601)的电源连通。

7.根据权利要求1所述的微藻批量保种培养装置，其特征在于，所述铝制恒温凹形孔板(302)凹槽内至少可放置一块96孔标准培养板，和/或一块48孔标准培养板，和/或一块24孔标准培养板。

8.通过权利要求1～7所述微藻批量保种培养装置批量培养微藻的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)用BG11液体培养基或f/2液体培养基，在液体培养基中加入10g/L琼脂粉，加热至完全溶解，加入到24孔、48孔或96孔标准培养板中，加入量为所述培养孔体积的1/3，无菌静止待其凝固，得固体培养基；

(2)准备100～200uL微藻藻种，将微藻藻种接种到步骤(1)中所述BG11液体培养基或f/2液体培养基中，浓度为1×10⁴～9×10⁴个/L，再用微量移液器将混合培养液加入到步骤(1)中所述固体培养基中，加入量为所述培养孔体积的1/3，并用透气封口膜密封；

(3)将步骤(2)接种后的微孔标准培养板置于上述微藻批量保种培养装置所述铝制恒温凹形孔板(302)凹槽内，盖上外箱体，打开电源，设定培养温度、光照强度和培养时间，并开始培养；当所述微藻细胞数量大于1×10⁷～9×10⁷个/L停止培养，放入4℃冷藏保种。

9.根据权利要求8所述的批量培养微藻的方法，其特征在于，所述微藻种类包括淡水藻或海水藻；其中，

所述淡水藻包括淡水小球藻、四尾栅藻或斜生栅藻，培养温度为26℃；

所述海水藻包括青岛大扁藻、海水小球藻或中肋骨条藻，培养温度为20℃。

10.根据权利要求8所述的批量培养微藻的方法，其特征在于，

所述BG11液体培养基的制备方法为：

Stock1定容100mL：柠檬酸0.3g、柠檬酸铁胺0.3g、EDTANa₂ 0.05g；

Stock2定容1000mL：NaNO₃ 30g、K₂HPO₄ 0.78g、MgSO₄·7H₂O 1.5g；

Stock3定容100mL：CaCl₂·2H₂O 1.9g；

Stock4定容100mL：Na₂CO₃ 2g；

Stock5定容1000mL：H₃BO₃ 2.86g、MnCl₂·4H₂O 1.81g、ZnSO₄·7H₂O 0.222g、Na₂MnO₄·2H₂O 0.391g、CuSO₄·5H₂O 0.079g、Co(NO₃)₂·6H₂O 0.049g；

再将Stock1取用2mL、Stock2取用20mL、Stock3取用2mL、Stock4取用1mL、Stock5取用1mL，并总定容至1000mL即得；

所述f/2液体培养基的制备方法为：

Stock1定容100mL：NaNO₃ 7.50g；

Stock2定容100mL：NaH₂PO₄·H₂O 0.50g；

Stock3定容100mL：Na₂SiO₃·9H₂O 3.00g；

微量元素储备液：CuSO₄·5H₂O 0.98g/100mL 1mL、ZnSO₄·7H₂O 2.20g/100mL 1mL、CoCl·6H₂O 1.00g/100mL 1mL、MnCl₂·4H₂O 18.0g/100mL 1mL、Na₂MoO₄·2H₂O 0.63g/100mL 1mL、Na₂EDTA 4.36g、FeCl₃·6H₂O 3.15g、加水定容至1000mL；

Vitamin：B1 10mg、Biotin 0.05mg、B12 0.05mg，加水定容至100mL；

再将Stock1取用1mL、Stock2取用1mL、Stock3取用1mL、微量元素储备液取用1mL、vitamin取用1mL，并总定容至1000mL即得。