[发明专利]一种可用于细胞生物学领域的马血清的制备方法

权利要求书

1.一种可用于细胞生物学领域的马血清的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、采血：称量供血马体重，计算采血量，对采血马匹剃毛、消毒之后，按照采血量采取适量的血液到采血瓶内，供血马采血间隔不得短于2周，每次采血量不得超过体重的1.1％，具体计算公式如下：总循环血量(升)＝体重(千克)×0.075，工作采血量(升)＝总循环血量(升)×15％；

S2、分离：采血后将采血瓶放置15-20℃沉淀8-24h，待自然出清后，以5000转离心40-60分钟，静置血清瓶待血清与红细胞明显分层，离心分离，离心之后吸取上层血清到无菌容器，分离好的血清应于零下20℃储存；

S3、过滤：把分离好的血清在无菌区内用0.8um滤膜过滤两次，0.45um滤膜过滤一次，用0.22um滤膜过滤一次；

S4、分装：将过滤后的血清在超净台中分装至500mL无菌瓶中，分装量为无菌瓶总体积的80％。

2.一种可用于细胞生物学领域的马血清的检测方法，其特征在于：包括马血清质量检测和细胞生物学检测，所述马血清质量检测包括微生物检测、总蛋白检测、血红蛋白检测、白蛋白检测、渗透压检测和pH测定，所述细胞生物学检测分为：SP2/0细胞生长曲线的绘制、SP2/0细胞倍增时间的测定和血清对于不同细胞系的促生长能力。

3.根据权利要求2所述的一种可用于细胞生物学领域的马血清的检测方法，其特征在于：所述微生物检测主要包括支原体、细菌和真菌的检测。

4.根据权利要求2所述的一种可用于细胞生物学领域的马血清的检测方法，其特征在于：所述总蛋白检测为检测血清中总蛋白的含量，总蛋白的含量设置在4g/100mL-6g/100mL。

5.根据权利要求2所述的一种可用于细胞生物学领域的马血清的检测方法，其特征在于：所述血红蛋白检测为检测血清中血红蛋白的含量，血红蛋白含量设置在小于12.0mg/dL。

6.根据权利要求2所述的一种可用于细胞生物学领域的马血清的检测方法，其特征在于：所述白蛋白检测为检测血清中白蛋白的含量，白蛋白含量设置在35-40g/L。

7.根据权利要求2所述的一种可用于细胞生物学领域的马血清的检测方法，其特征在于：所述渗透压检测为检测血清中渗透压的范围，血清渗透压的范围设置在250-330mosm/kg±5mosm/kg。

8.根据权利要求2所述的一种可用于细胞生物学领域的马血清的检测方法，其特征在于：SP2/0细胞最大倍增浓度不低于1×10⁶/ml，SP2/0细胞倍增时间不超过20小时。